CITOGENÉTICA
ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS ESTRUTURAIS
Quebra cromossômica seguida de reconstrução em uma combinação anormal
Existem de dois tipos
Não balanceados
Informações a mais ou a menos
Pode haver de dois tipos
Deleções
Um pedaço do cromossomo é deletado
Síndrome de Wolf-Hirshhorn
Região 4p deletada
Apresenta clinicamente
Retardo mental
Microcefalia
Hipertelorismo
Micrognatia
Criptorquidismo e hipospadia
Síndrome Cri du Chat
Região 5p deletada
Apresenta clinicamente
Retardo mental
Hipertelorismo
Rosto arredondado
Choro como miado de gato
Síndrome de Angelman
Região 15q11-q13 materno
Apresenta clinicamente
Retardo mental grave
Língua protrusa
Ausência de fala
Andar desengonçado
Monossomia 1p36
Região 15q.11-q13 paterno
Apresenta clinicamente
Retardo mental e de crescimento
Surdez
Puberdade precoce
Síndrome de Prader-Willi
Região 15q 11-q13 paterno
Apresenta clinicamente
Obesidade
Hipotonia
Retardo mental
Hipogonadismo
Duplicações
Um pedaço do cromossomo é duplicado
Síndrome de Down leve
Beckwith Wiedemann
Região 11p15.5
Apresenta clinicamente
Organomegalia
Hipoglicemia
Macroglossia
Duplicação de 15q11,2-q13
Apresenta clinicamente
Autismo
Anomalias faciais leves
Nariz pequeno e arredondado
Duplicação de 7q11.23
Apresenta clinicamente
Dismorfismo facial
Sutura metópica aparente
Atraso no desenvolvimento
Balanceadas
Há dois tipos
Inversões
Duas quebras em um cromossomo e re-união em posição invertida
Possui dois tipos
Paricêntrica
Não envolve o centrômero e ocorre no mesmo braço
Pericêntrica
Envolve o centrômero
Terá problema com a progênie pois
Produzirá gametas anormais não-balanceados
Translocações
Transferência de uma parte do cromossomo para outro
Possui dois tipos
Robertsonianas
No entanto
Há riscos de ter gametas não-balanceados
Cromossomos acrocêntricos se fusionam
Pois
Há perda de braços curtos
Recíprocas
Pedaços dos cromossomos são translocados reciprocamente
Por isso
Não há perda de material genético
Não resulta em fenótipos anormais
ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS NUMÉRICAS
Euploidias
Poliploidias
Tetraploidia
Normalmente resultam em
abortos espontâneos durante
o primeiro semestre
Causas mais comuns
Falha durante a anáfase da mitose
Cêntromeros não se dividem e cromossomos não se separam
Falha da divisão por clivagem inicial do zigoto
Fusão entre duas células
Falha na citocinese
Só é compatível com a vida se for em mosaicismo
Alterações que
envolvem o conjunto
básico de cromossomos
Aneuploidias
Acontecem em alguns cromossomos do indivíduo
Possíveis causas
Cromossomos nulissômicos
Cromossomos dissômicos
Não-disjunção dos cromossomos homólogos
Não-disjunção dos cromossomos homólogos
Podem envolver 2 tipos de cromossomos
Sexual
Existem dois tipos
Trissomia
Podem estar relacionados ao
Cromossomo Y
Cromossomo X
Síndrome do triplo X
Cariótipo 47, XXX
Apresenta clinicamente
Altas
Puberdade precoce
Retardo mental grave
Geralmente férteis
Síndrome de Klinefelter
Apresenta clinicamente
Testículos pequenos
Inférteis
Ginecomastia
Estatura elevada
Cariótipo 47, XXY
Monossomia
Podem estar relacionados ao
Cromossomo X
Cromossomo Y
Nunca visto em vivos
Autossômico
Podem existir
Trissomias
Cromossomo repetido 3 vezes
Síndrome de Patau
Cariótipo 47, XX + 13 ou 47, XY + 13
Apresenta clinicamente
Retardo mental
Microcefalia
Fendas labial e palatina
Síndrome de Edward
Cariótipo 47, XX + 18 ou 47, XY + 18
Apresenta clinicamente
Retardo mental
Genitais externos anômalos
Pescoço curto
Síndrome de Down
Cariótipo 47, XX +21 ou 47, XY+21
Apresenta clinicamente
Baixa estatura
Fendas palpebrias elevadas
Demência mental moderada
Prega epicântica
Língua sulcada e saliente
Trissomia do 16
Letal
Existe também a nulossomia tento em cromossomos autossômico quanto em sexual
Ausência dos dois membros de um mesmo par cromossômico
CITOGENÉTICA CONVENCIONAL
Gametogênese
Feminina
Início
Por volta do terceiro mês de vida intrauterina
Tem um número de gametas fixo no nascimento e é interrompida na menopausa
Órgãos envolvidos
Meiose I no ovário
Se houver fecundação
Meiose II termina na tuba uterina
Toda meiose ocorre no testículo
Após completar espermiogênese
Vão para o epidídimo pelos tubos seminíferos
Número de células viáreis
Uma ovogônia
1 oócito maduro
3 corpúsculos polares
Uma espermatogônia
Vai gerar
4 espermatozóides
Diferenças morfológicas
Oócito
É uma
Célula grande e redonda
E apresenta
Citoplasma bem volumoso
Espermatozóide
Vai apresentar
Flagelo
Cabeça, corpo e causa
A cabeça possui
Núcleo e acrossomos
Masculina
Começa na puberdade e continua até o fim da vida
Ciclo celular
Interfase
Apresenta 3 fases
G1
Responsável pela
Síntese de RNA, proteínas e organelas
S
Responsável pela
Síntese de DNA
Célula vira tetraploide
G2
Responsável pela
Maturação celular
Vai haver checkpoint nessa fase para
Conferir se DNA foi replicado
Ativa síntese de proteínas
Intensa atividade e preparo para divisão
Fase M
Existem dois jeitos
Meiose
Possui duas fases
Meiose I
Dividido em 4 etapas
Prófase I
Dividida em 5 subfases
Leptóteno
Cromossomos duplicados, finos e longos
Zigóteno
Pareamente de cromossomos homólogos
Paquíteno
Crossing-over
Diplóteno
Formação de quiasma
Diacinese
Desaparecimento do nucléolo
Formação das fibras do fuso
Metáfase I
Em que acontece
Desenvolvimento do fuso
Cromossomos no plano equatorial
Anáfase I
Em que acontece
Separação de cromossomos não-homóglos
Rompimento dos pontos de quiasma
Telófase I
Em que acontece
Divisão do citoplasma e citocinese
Em seguida acontece uma fase intermediária chamada
Intercinese
Em que acontece
Desaparecimento do fuso
Reorganização da membrana nuclear
Descondensação dos cromossomos
Meiose II
É dividido em 4 partes
Prófase II
Em que acontece
Condensação dos cromossomos
Desaparecimento do envoltório nuclear
Reconstituição das fibras do fuso
Metáfase II
Anáfase II
Telófase II
Em que acontece
Reorganização do envoltório nuclear
Citocinese e divisão do citoplasma
Descondensação dos cromossomos
Em que acontece
Cromossomos no plano equatorial formando 2 placas equatoriais
Mitose
É dividido em 4 fases
Prófase
Em que acontece
Cromossomos começam a se condensar
Centrossomos se digerem para os pólos opostos da célula
Formação do fuso mitótico e desaparece nucléolo e carioteca
Metáfase
Em que acontece
Cromossomos atingem o máximo de concensação
Cromossomos na zona equatorial da célula
Anáfase
Em que acontece
Cromossomos são puxados para pólos opostos da célula
Telófase
Em que acontece
Desaparecimento do fuso mitótico
Reaparecimento do nucléolo
Acontece a citocinese
Evento de divisão da célula originando 2 células-filhas
Anel contrátil fica gradualmente menor
Célula é "estrangulada"
Processo realizado para
Reposição de células
Célula filha = célula mãe
CITOGENÉTICA MOLECULAR
Classificação dos cromossomos
Dividido de acordo com a posição do centrômero
Acrocêntrico
Apresenta
Braço curto e longo bem distintos
Sub-metacêntrico
Apresenta
Pouca diferença entre os tamanhos dos braços
Metacêntrico
Braços curtos e longos idênticos
FISH
Por meio da
Hibridização em situ por Fluorescência
Consiste em 4 passos
Desnaturação
onde há
Aquecimento à 70-72 graus celsius para quebrar pontes de hidrogênio
Hibridização
Em que acontece
Incubação na lâmina à 37 graus celsius por 10-16 horas
Lavagem
Onde
Há solução de sais e formamida para limpeza de ligações inespecíficas
Coloração com DAPI
Em que
O marcador fluorescente que se liga à ligações AT deixando o cromossomo incolor
Utilização de sondas marcadas por fluorocromo
Em que
A avaliação cromossômica
É feita por
1. Regiões
2. Inteiros
3. Sequências específicas de DNA nos núcleos interfásicos
Pode-se analisar com FISH em qualquer fase da divisão e núcleo interfásico
Há duas alternativas mais conhecidas
SKY
Que consiste em
Analisar todos os cromossomos inteiros
Painting
Que consiste em
Analisar alguns cromossomos inteiros com o mesmo grau de especificidade
Estudo dos cromossomos e suas características
Cariograma
Faz a
Representação do cariótipo
Se faz uso de colchicina e demecolcine para congelar as células na fase de metáfase
A montagem apresenta 6 etapas
1. Inoculação das células em solução antimicrobiana
Adiciona agente mutagênico
2. Estabilização da temperatura a 37 graus celsius
3. Bloqueio da divisão na metáfase
4. Tratamento hipotônico
Dispersão dos cromossomos
5. Fixação dos cromossomos com metanol e gotejamento na lâmina
6. Imersão em um corante escolhido
Por fim
São dispostos de forma ordenada de acordo com a morfologia e tamanho
Preparo e coloração das células
Triploidias
Dispermia
Óvulo n fecundado por dois espermatozóides n.
Diginia
Óvulo 2n fecundado por um espermatozóide n
Diandria
Óvulo n fecundado por espermatozóide 2n
Gametas materno e paterno
2n e, depois, acontece a
mutação genética 4n
Síndrome 47, XXY
Causada pela não-disjunção paterna na meiose II
Apresenta clinicamente
Férteis e altos
Inteligência normal
Síndrome de Turner
Apresenta clinicamente
Anomalias renais e cardiovasculares
Baixa estatura
Inférteis
Pescoço alado
Amenorréia primária
Cariótipo 45,X
Monossomias
Perda de um dos membros do par do cromossomo
Monossomia do cromossomo 21
Sobrevive somente se for mosaico
Apresente clinicamente
Hipertricose
Implantação baixa da orelha
Macrostomia
Faz parte disso dois tipos de cromossomos
Isocromossomos
Um braço do cromossomo está duplicado e outro deletado
Cromossomos em anel
Deleção das extremidades de um mesmo cromossomo se unem