ELECTROFORESIS
¿PARA QUÉ SIRVE?
Separar y determinar una gran cantidad de analitos
FENÓMENO QUE APARECE
Flujo electroosmotico
¿Qué es?
Flujo del liquido dentro del capilar debido a la carga superficial sobre la pared interior del capilar
PARED
CAPA DE STERN
CAPA DIFUSA
FEO
¿De qué depende?
Velocidad del FEO
Movilidad del FEO
Potenicial zeta
Depende de la carga superficial de la pared del capilar
CARGA DEL CAPILAR
Depende del pH
pH ALTO
FLUJO RÁPIDO
pH CONTROLADO
Subtema
pH BAJO
FLUJO LENTO
Permeabilidad del medio
Caracteristica única
Perfil plano dentro del capilar
No hay perdida de carga
Flujo uniforme
No genera dispersión del analito
¿Qué causa?
Movimiento de todas las especies
SUPONEMOS QUE CONECTAMOS PARA QUE EL FLUJO SE MUEVA DE ÁNODO A CÁTODO
Los cationes migrarán rapidamente al CÁTODO, debido a el FEO y la atracción electroforética hacia él
Los compuestos neutros serán arrastrados a la velocidad del FEO (pero no serán separados)
Los aniones migrarán lentamente al CÁTODO, debido a que atraidos por el ÁNODO (en el sentido contrario) pero son arrastrados por el FEO hacia el CÁTODO.
CONTROLA EL TIEMPO QUE PERMANECE UN ANALITO EN EL CAPILAR
debido a la superposición de
FLUJO
MOVILIDAD DEL ANALITO
¿Cómo lo controlo?
Campo electrico
pH
Solución{on reguladora
Aplicaciones
Biotecnológicas
Farmaceuticas
Alimenticias
Bioquímica clínica
Análsis toxicologicos y forenses
¿En que se basa?
Las diferencias de velocidad de desplazamiento de los analitos en un campo eléctrico.
¿Qué genera esa velocidad?
ANALITO
SU CARGA
NEUTRA
SU MASA
DIFERENCIA DE POTENCIAL
Voltaje
Modifica
Eficiencia
Tiempo de migración
MUESTRA
Viscosidad
Debida a la temperatura
pH
Solubilidad
EQUIPO
CAPILAR
Material
Diametro
Longitud
GEL
MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA
Que depende de
Fuerza electrica
CARGA Y CAMPO ELÉCTRICO
Fuerza friccional
VISCOSIDAD DE SOLUCIÓN
RADIO DEL IÓN
VELOCIDAD DEL IÓN
PASO A PASO
Acondicionar el capilar
Antes
Entre cada corrida
Limpieza
Preparar la muestra
Conectar la muestra al capilar
Puesta en marcha con diferencia de potencial
Lectura
Depende del detector
Identificación y cuantificación