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a Sharon Garofalo 6 éve

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Réticulo sarcoplásmico Ca2

El estudio se centra en la captación y liberación del calcio en las fibras musculares esqueléticas humanas, diferenciando entre los tipos de fibras I y II. Se utilizan técnicas avanzadas como el western blotting para identificar la presencia de isoformas de troponina C y se evalúa el efecto del ADP sobre la fuga de Ca2+ del retículo sarcoplásmico.

Réticulo sarcoplásmico Ca2

el SERCA1 migró con un peso molecular aparente más alto que el SERCA2,

presencia de isoformas lentas y rápidas de troponina C

14 fibras tipo I y 22 fibras tipo II de 15 sujetos adultos jóvenes.

cantidad absoluta de Ca 2+ presente en la RS es más baja en las fibras de tipo I que en las de tipo II

soluciones de carga amortiguada de Ca 2+

cantidad neta de Ca 2+ acumulada por la SR

hubo muy poco o ningún CICR en las fibras musculares humanas tipo I o tipo II

la captación neta de Ca 2+ no cambió

soluciones de carga con el Ca 2+ fuertemente amortiguado en pCa 6.0 y con el Mg 2+

se examinó en cada una de cuatro fibras de tipo I y cuatro de tipo II

aumentó progresivamente a medida que el ADP aumentó

fugas de Ca 2+ en las fibras de rata

mayor en las fibras tipo I que en las de tipo II,

las fibras humanas que la fuga de Ca 2+ de SR en pCa 8.5

SR Ca 2+ fuga y efecto de ADP

Liberación de calcio inducida por calcio

Dependencia de calcio y tasa máxima de captación de SR Ca 2+

Determinación de tipo de fibra e isoformas de SERCA.

El Ca 2+ puede filtrarse

Resultados

todos los geles dio resultados similares

normalizó mediante la medida de la proteína total

la densidad de las bandas de SERCA

El tipo de fibra se definió por (MHC) predominante

La proteína total en las fibras se separó en 4 a 15% de geles libres de tinción

fibra de piel con tampón de solubilización

Western blotting

libere el SR Ca 2+

fuertes

débiles

solución de fuga con el ADP

solución de carga con un amortiguador moderado de Ca 2+

La pérdida de Ca 2+ en el SR

muestra de músculo extirpado

Homologaciones éticas, biopsias musculares y disección

biopsias de músculo vasto lateral

Métodos

sarcopilina

responsable del 40–50% de la tasa metabólica flotante

producción de calor y la termogénesis

con ADP

del SERCA

la fuga de Ca 2+ a

tipo I y tipo II

la absorción se produjo con una afinidad similar

fibras musculares esqueléticas humanas.

captación

absorbe menor Ca 2+

absorbe mayor Ca 2+

(ambas ∼pCa 6.7)

Ensayos de experimentos de fuga de SR Ca 2+ con varios mioplasma [ADP]

ciclos repetidos de carga y liberación

La fibra sin piel en solución estándar de K-HDTA

solución de liberación completa

la SR se vació de todo su Ca 2+ liberable

se equilibró con HDTA

Las fibras se recubrieron con aceite de parafina

Contenido de SR Ca 2+ y ensayo de tasa de absorción de Ca 2+

mantienen la concentración de ADP

retienen altos niveles de actividad de creatina quinasa

Las fibras musculares

concentraciones de EGTA libre

solución K-HDTA

fibras tipo l

fibras tipo ll

La SR se volvía a cargar con Ca 2+

Soluciones de fibra pelada

SERCA 2

SERCA l

temperatura ambiente

El baño de metacrilato con base de K +

placa de Petri con aceite de parafina y frio

Preparaciones y grabación forzada

15 sujetos descansados, sanos y participan en actividades fisicas

almacenaron en nitrógeno líquido

diseccionaran las fibras musculares individuales

el retículo plasmático sarco (endo) Ca 2+ - ATPasa (SERCA)

secuestrado

El Ca 2+

en las cisternas de la terminal

aceite de parafina

canales de liberación de Ca 2+

rianodina

liberado en el citoplasma

unión al Ca 2+ de alta capacidad y baja afinidad

calsequestrina

Propiedades

contracción en el músculo esquelético

aparato contráctil

fuerza

la liberación y re captación de Ca 2+

Réticulo sarcoplásmico Ca2