a Sharon Garofalo 6 éve
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Réticulo sarcoplásmico Ca2
el SERCA1 migró con un peso molecular aparente más alto que el SERCA2,
presencia de isoformas lentas y rápidas de troponina C
14 fibras tipo I y 22 fibras tipo II de 15 sujetos adultos jóvenes.
cantidad absoluta de Ca 2+ presente en la RS es más baja en las fibras de tipo I que en las de tipo II
soluciones de carga amortiguada de Ca 2+
cantidad neta de Ca 2+ acumulada por la SR
hubo muy poco o ningún CICR en las fibras musculares humanas tipo I o tipo II
la captación neta de Ca 2+ no cambió
soluciones de carga con el Ca 2+ fuertemente amortiguado en pCa 6.0 y con el Mg 2+
se examinó en cada una de cuatro fibras de tipo I y cuatro de tipo II
aumentó progresivamente a medida que el ADP aumentó
fugas de Ca 2+ en las fibras de rata
mayor en las fibras tipo I que en las de tipo II,
las fibras humanas que la fuga de Ca 2+ de SR en pCa 8.5
SR Ca 2+ fuga y efecto de ADP
Liberación de calcio inducida por calcio
Dependencia de calcio y tasa máxima de captación de SR Ca 2+
Determinación de tipo de fibra e isoformas de SERCA.
El Ca 2+ puede filtrarse
Resultados
todos los geles dio resultados similares
normalizó mediante la medida de la proteína total
la densidad de las bandas de SERCA
El tipo de fibra se definió por (MHC) predominante
La proteína total en las fibras se separó en 4 a 15% de geles libres de tinción
fibra de piel con tampón de solubilización
Western blotting
libere el SR Ca 2+
fuertes
débiles
solución de fuga con el ADP
solución de carga con un amortiguador moderado de Ca 2+
La pérdida de Ca 2+ en el SR
muestra de músculo extirpado
Homologaciones éticas, biopsias musculares y disección
biopsias de músculo vasto lateral
Métodos
sarcopilina
responsable del 40–50% de la tasa metabólica flotante
producción de calor y la termogénesis
con ADP
del SERCA
la fuga de Ca 2+ a
tipo I y tipo II
la absorción se produjo con una afinidad similar
fibras musculares esqueléticas humanas.
captación
absorbe menor Ca 2+
absorbe mayor Ca 2+
(ambas ∼pCa 6.7)
Ensayos de experimentos de fuga de SR Ca 2+ con varios mioplasma [ADP]
ciclos repetidos de carga y liberación
La fibra sin piel en solución estándar de K-HDTA
solución de liberación completa
la SR se vació de todo su Ca 2+ liberable
se equilibró con HDTA
Las fibras se recubrieron con aceite de parafina
Contenido de SR Ca 2+ y ensayo de tasa de absorción de Ca 2+
mantienen la concentración de ADP
retienen altos niveles de actividad de creatina quinasa
Las fibras musculares
concentraciones de EGTA libre
solución K-HDTA
fibras tipo l
fibras tipo ll
La SR se volvía a cargar con Ca 2+
Soluciones de fibra pelada
SERCA 2
SERCA l
temperatura ambiente
El baño de metacrilato con base de K +
placa de Petri con aceite de parafina y frio
Preparaciones y grabación forzada
15 sujetos descansados, sanos y participan en actividades fisicas
almacenaron en nitrógeno líquido
diseccionaran las fibras musculares individuales
el retículo plasmático sarco (endo) Ca 2+ - ATPasa (SERCA)
secuestrado
El Ca 2+
en las cisternas de la terminal
aceite de parafina
canales de liberación de Ca 2+
rianodina
liberado en el citoplasma
unión al Ca 2+ de alta capacidad y baja afinidad
calsequestrina
Propiedades
contracción en el músculo esquelético
aparato contráctil
fuerza
la liberación y re captación de Ca 2+
Réticulo sarcoplásmico Ca2