CAPITOLO 17
proteine umane
fasi produttive
1- individuare gene codificante info
2- gene inserito in cellula con vettore
coltivata
proteina estratta e purificata
in ambiente sterile
Argomento principale
proteine terapeutiche
Sottoargomento
espresse con:
batteri
lieviti
cellule animali
eccipienit
scale-up
Sottoargomento
cellule animali
melanoma
tumorali
rischi
instabilità
contaminazione
alta richiesta nutrienti
tumori ibridanti
Argomento principale
PRODUZIONE DI VACCINI
sostanze antigeniche produttrici di una reazione immunitaria specifica
ottenuti da diverse fonti
microrganismi vivi ma attenuati
attenuati con mezzi fisici chimici
virulenza ridotta
potere patogeno attenuato
es. morbillo
microrganismi uccisi
somministrati in più dosi
es. epatite A
tossoidi
tossine proteiche
purificate
es.tetano
polisaccaridici
purificazione dei polisaccaridi
es.streptococcus
PROTEINE IMMUNOGENE
vettore innocuo
introduce geni prodotti da anticorpi
pure
DNA ricombinante
prodotte dal microrganismo sintettizante
microrganismi
modificano geni responsabili della patogenicità
ANTICORPI MONOCLONALI
prodotti da un unico clone
da linfociti B in cellule tumorali mieloma (ibriomi)
si legano selettivamente
utilizzi
mezzo diagnostico
vettori
difesa contro agenti esterni
PRODUZIONE ORMONI TERAPEUTICI
insulina
2 catene polipeptidiche A e B 1 catena proteica C
produzione di catena A e B poi ricombinate
permette trasferimento glucosio da sangue a celluel
prima estratta da animale poi biotecnologicamente
somatostatina
regola produzione altri ormoni
ormone della crescita
regola accrescimento del corpo
produzione
estrazione mRNA
estrazione endonucleasi
stampo cRNA trascritasi
sintesi chimica catena
DNA ligasi e inserimento nel plasmide
plasmide in e.cole produce ormoni
estrazione purificazione
FATTORI DI CRESCITA EMOPOIETICI
eritropoietina
produzione
trovare sequenza amminoacidica
DNA con virus vettore in cellule batteriche
DNA sonda cerca gene
da mRNA a cDNA
cDNA in plasmide
plasmide in cellula batterica
gene clonato inserito in ovaie animali
prodotte in bioreattori
estratte e purificate
trasforma le cellule da immature nel midollo osseo a cellule ematiche funzionali
SINTESI CHEMIO ENSIMATICHE
bioconversioni
sintesi chimica velocizzata da biocatalizzatori
ormoni steroidei
glucocorticoidi
mineralcorticoidi
progestinici
estrogeni
PRODUZIONE VITAMINE
idrosolubili
B1, B2, B12, C
produzione
B12
prodotta da microrganismi
fase in anaereobiosi e aereobiosi
proprionobacterium
C
biotrasformazione
gluconobacterium oxydans
in colura sommersa, 30-35 T, agitazione
liposolubili
A, D , E, K
PRODUZIONE ANTIBIOTICI
effetto
microbiocida- uccide batteri
microbiostatico- blocca riproduzione batteri
produzione
terreni ricchi di C e N e nutrienti
2 fasi
sporificazione e germinazione
trofofase massimo sviluppo biomassa
idofase sintesi metabolica
produzione in fermentarori
caratteristiche
trasferimento O2
capacità trasferimento calore
efficiente agitazione
Sottoargomento
prodotti nella fase stazionaria
alto rischio inquinamento
terreni ricchi
pH neutro
lunghi tempi fermentativi
microrganismi da qui si riproducono
muffe peniccilum
batteri filamentosi streptomyces
batteri non filamentosi bacillus
PRODUZIONE PENICILLINE
Nnaturali G e V
semisintetiche
resistenti a beta galattosidasi
antibiotici beta lattamici
produzione
coltura sommersa a 25-27 C
2 fasi
sviluppo
terreno glucosio saccarosio, pH 6-7 , no eccessiva acidità
produzione
terreno lattosio glucosio, pH 7-7,2, fonti C e N, acido fenilacetico e fenossiacetico
ampio spettro
cefalosporine
spettro più ampio, minor tossicità, più generazioni
2 tipi
semisintetiche prodotte da cefalosporine C o penicilline G o V
naturali, prodotte da peniccilline naturali
MOLECOLE IMPIEGO MEDICO
statine
inibiscono sintesi colesterolo, contro colesterolemia
antitumorali
bloccano mitosi cellulare
sostanze
azione immunodepressa
antiparassitarie