Crecimiento y control microbiano
Crecimiento de las poblaciones
Aspectos Cuantitativos
Gráficos semilogaritmicos son útiles para estimar tiempos de generación de cultivo
Diferentes representaciones de datos del crecimiento
El aumento del numero de celulas en un cultivo de crecimineto exponencial se puede basar en progrecion geometrica del numero 2
Al inicio el crecimiento es lento
Fases de crecimiento
Fase de latencia
El crecimiento empieza solo tras un periodo de tiempo que es la fase de latencia
periodo puede ser largo o corto dependiendo de la inoculacion y de la naturaleza del medio
Fase exponencial
La población de las células se duplican en intervalos regulares
La velocidad varia mucho y depende de condiciones ambientales
Fase estacionaria y fase de muerte
mas lenta que la de crecimiento
Se da si se agotan los nutrientes o se acumulan desechos del organismo la población entra en la fase estacionaria
Cultivo continuo
Variacion de los parametros del quiostato
Celulas en fase exponencial son preferidas para lso experimentos fisiologicos
Quimiostato: dispositivo que puede controlar de manera independiente la velocidad de crecimiento y la densidad celuala
Medida de crecimiento Microbiano
Recuento de celulas viables
Método de siembra por extencion y vertido en placa
El numero de colonia depende de un experimento de recuento y las condiciones de incubación
El uso de medios y condiciones de cultivo muy selectivos
Los recuentos microscópicos directos de muestras naturales suelen detectar muchos más microorganismos de los que son recuperables
Recuento por microscopia
Es difícil ver células pequeñas en el microscopio, lo que pude llevar a cabo recuentos erróneos
Usan colorantes para visualizar las células, a menudo colorantes muy potentes que aportan información filogenia sobre las células
Espectrofotometria
Mediciones turbidimétricas son rápidas y fáciles de hacer, y además normalmente no destruyen ni alteran significativamente la muestra
Para organismos unicelulares, la densidad óptica es proporcional, dentro de ciertos límites, al número de células
Muchos microorganismos crecen en suspensiones uniformes en medio líquido, otros muchos no lo hacen
Control del crecimiento microbiano
Principios generales y control del crecimiento por el calor
Esterilización por calor: Todos los microorganismos tienen un máximo de temperatura de crecimiento más allá del cual no pueden crecer: normalmente se destruyen
El autoclave y la pasteurización
: La pasteurización utiliza calor controlado de manera precisa para reducir significativamente el número total de microorganismos que se encuentran en la leche y otros líquidos que se estropearían si se esterilizasen en el autoclave
Radiación ultravioleta e ionizante: Radiación ultravioleta e ionizante
Otros métodos físicos de control: radiación y filtración
El calor es una manera eficaz de descontaminar la mayoría de los líquidos, pero los que son sensibles al calor y los gases deben esterilizarse por otros métodos
Control químico del crecimiento microbiano
agentes bacteriostáticos son típicamente inhibidores de algunos procesos bioquímicos importantes, como la síntesis de proteínas, y se unen de manera relativamente débil, se unen con fuerza a sus dianas celulares y, por definición, matan las células. No obstante, las células muertas no se lisa
La actividad antimicrobiana también se puede evaluar usando medios sólidos
Agentes antimicrobianos químicos
: Los desinfectantes son productos que matan microorganismos, pero no necesariamente endosporas, y se usan en objetos inanimado
Crecimeinto microbiano
Efecto del pH en el crecimiento microbiano
Acidófilos
Crecen mejor a pH por debajo de 5,5 se llaman acidófilos.
Existe un grupo muy restringido que crece de
manera óptima a pH por debajo de 2
pH citoplasmático y tampones
El pH óptimo para el crecimiento de un organismo se refiere únicamente al ambiente extracelular; el pH intracelular debe permanecer cerca de la neutralidad para impedir la destrucción de las macromoléculas
Para impedir grandes variaciones de pH durante el crecimiento microbiano en cultivos discontinuos se suelen añadir soluciones amortiguadoras
Alcalofilos
se encuentran normalmente en hábitats muy alcalinos, como lagos alcalinos y suelos muy carbonatados
Osmolaridad y crecimiento microbiano
Los microorganismos que viven en ambientes marinos casi siempre tienen necesidad de NaCl, y normalmente crecen mejor al valor de actividad acuosa propio del agua de mar
Son normalmente moléculas orgánicas muy solubles en agua como azúcares, alcoholes o derivados de aminoácidos
Cuando un organismo se transfiere de un medio con aw alto a otro con aw bajo, mantiene el balance positivo aumentando su concentración interna de soluto
Oxígeno y crecimiento microbiano
Muchos aerobios son facultativos, lo que significa que en condiciones adecuadas de nutrientes y cultivo pueden crecer en ausencia de O
Algunos organismos no pueden respirar oxígeno, y reciben el nombre de anaerobios
los anaerobios aerotolerantes, que pueden tolerar el O2 y crecer en su presencia aunque no lo respiren,
anaerobios estrictos, a los que el oxígeno inhibe o incluso mata
Para el cultivo de los anaerobios lo necesario no es aportar oxígeno, sino excluirlo
Superóxido-dismutasa y otras enzimas que destruyen formas tóxicas de oxígeno
Así, independientemente de si puede respirar oxígeno, un organismo expuesto a él entrará en contacto con formas tóxicas de este elemento, y si no las destruye, estas moléculas causarán estragos en las células
El anión superóxido y el peróxido de hidrógeno son las especies tóxicas del oxígeno más abundantes, y las células tienen enzimas para destruirlas
Los aerobios y los aerobios facultativos normalmente cuentan tanto con superóxido-dismutasas como con catalasas. La superóxido-dismutasa es una enzima esencial para los aerobios
División celular bacteriana
Fisión binaria
Abundante numero de células
Células duplican su tamaño original y se produce la división de 2 células hijas
Proteína Fts y división celular
Fisión binaria junto con la tibulina son importantes en la división eucaristía
El divisioma contiene contiene Fts necesarios para las sintesis del petidoglicano
MinC, MinD y MinE interaccionan para guiar a FtsZ hasta el punto medio de la duplicación del ADN
Replicación del genoma en las células de manera avanzada y retrasada lo cual permite que el DNA se replique lo más rápido
Proteína MreB y morfología celular
MreB es el nombre de la proteína del factor determinante de la forma de las bacterias
El citoesqueleto de MreB define la forma de la célula mediante la incorporación de otras proteínas
En la crescentina se organizan los filamentos
Son necesarias para la curvatura de la celula
Biosintesis del peptidoglicano
Se forman los puetes peptidicos entre los residuos de acido muramico
La síntesis del nuevo peptidoglicano necesita un corte preexistente
Efecto de la temperatura en el crecimiento microbiano
Microorganismos según la temperatura
Temperaturas cardinales
TEMPERATURA ALTA: Las reacciones enzimáticas aumentan la velocidad y el crecimiento se acelera
TEMPERATURA BAJA: temperaturas por el cual no es posible el crecimiento
TEMPERATURA OPTIMA: Crecimiento bacteriano adecuado
Vida microbiana en bajas temperaturas
CLIMAS FRÍOS: Grandes extensiones del Ártico y de la Antártida están permanentemente congeladas, por tanto, no resulta sorprendente que los mejores ejemplos de bacterias y arqueas activas a bajas temperaturas se encuentren en estos ambientes.
Adaptaciones moleculares para la psicrofilia}
Microorganismos psicrófilos y psicrotolerantes
Los psicrófilos producen enzimas que funcionan a menudo de manera óptima en el frío y que pueden desnaturalizarse o inactivarse a temperaturas incluso muy moderadas
Una mayor cantidad de ácidos grasos instautrados y de cadena corta en la membrana citoplasmática permite a la membrana mantener su estado semifluido a bajas temperatura
Vida microbiana a altas temperaturas
Ambientes con temperaturas altas
Organismos cuya temperatura óptima de crecimiento supera los 45 °C se llaman termófilos, y aquellos cuya temperatura óptima está por encima de los 80 °C son hipertermófilos
Estabilidad de las proteínas a altas temperaturas: Sus enzimas y otras proteínas son mucho más estables frente al calor que las de los mesófilos
La estabilidad térmica de las proteínas de los hipertermófilos también está reforzada por un mayor número de enlaces iónicos entre aminoácidos básicos y ácidos y el interior de la proteína
varias enzimas termoestables han demostrado que su secuencia de aminoácidos a menudo difiere muy poco de la de las formas termosensibles
Estabilidad de las membranas a altas temperaturas: las membranas citoplasmáticas de los termófilos y los hipertermófilos deben ser termoestables