PCR DIGITAL
Más recientemente, la PCR digital está ganando popularidad como un nuevo enfoque para la cuantificación de ácidos nucleicos, ya que permite la cuantificación absoluta del objetivo. Hoy en día existen varias plataformas comerciales de PCR digital que aplican el principio de la PCR digital,de las cuales la QX200 ddPCR de Bio-Rad es actualmente la plataforma más utilizada en la investigación del VIH.
PCR Tiempo real
La herramienta estándar para cuantificar el ADN del VIH y el ARN viral asociado a las células ha sido la PCR
¿QUE ES?
es una técnica avanzada de cuantificación que ofrece alta sensibilidad y precisión al proporcionar resultados absolutos. Este método se basa en la dilución limitante, donde las moléculas objetivo se destruyen aleatoriamente entre múltiples fracciones.
Posibles fuentes de falsos positivos en PCR digital
Contaminación cruzada
Cuando se presenta una alta sensibilidad de la dPCR se puede evidenciar pequeñas cantidades de ADN viral contaminante en reactivos, superficies o instrumentos al momento del análisis.
Al tomar una muestra con baja o nula carga viral puede parecer positiva si se contaminó accidentalmente.
Ruido de fondo en la detección fluorescente.
En los diferentes compartimientos individuales de la dPCR, pueden existir señales fluorescentes no específicas que se interpreten erróneamente como positivas.
Errores en el analisis automatizado
Reacciones inespecificas de las sondas
Ventajas
Alta sensibilidad (detecta una sola copia).
Precisión en muestras con baja carga viral.
Menor susceptibilidad a inhibidores de la PCR.
Cuantificación reproducible.
UNIVERSIDAD MANUELA BELTRAN
PREGRADO PSICOLOGIA
MATERIA: NEUROBIOLOGÍA
INTEGRANTES:
• Yessica Lizeth Anzola Sepulveda
• Paula Díaz Velasquez.
• Donis Acevedo Correa
• Isabela Calderon Paez
Aunque la terapia antirretroviral es capaz de suprimir la replicación del VIH en pacientes infectados, el virus persiste y rebrota cuando se interrumpe el tratamiento. Para encontrar una cura que pueda erradicar el reservorio latente, es necesario poder cuantificar el virus persistente.
ANTECEDENTES
Durante la terapia antirretroviral (TAR), el VIH puede persistir durante décadas en las células T CD4 + infectadas de forma latente como ADN proviral integrado en el genoma humano. Si se interrumpe la terapia antirretroviral, el reservorio proviral alimenta la viremia de rebote, por lo que se considera un obstáculo importante para la curación del VIH