Extracción de fosfolípidos y determinación del índice de yodo
Primera parte: Extracción de fosfolipidos: cefalina y lecitina
1) Tomar el peso de:
A. Vaso de precipitado = 51.1g
B. Vaso de precipitado + yema de huevo = 69.1g
C. Erlenmeyer = 112.6g
D. Papel filtro = 1.2g
2) Mezlcar
Yema de huevo + 15 mL Éter. Revolver con un agitador de cristal por 2 minutos hasta tener una mezcla homogénea.
Agregar la acetona. Esto generará un precipitado. Agitar por 2 minutos.
Decantar
3) Filtrado
Humedecer el papel de filtro con etanol para que se adhiera al embudo.
Fltrar por gravedad utilizando un embudo + papel de filtro + erlenmeyer.
Se utiliza etanol para limpiar el vaso de precipitado para no perder la muestra.
Se utiliza etanol debido a que la lecitina es soluble en este.
Lavar el alcohol restante, añadir poco a poco.
Filtrado
Tiene la lecitina.
Papel de filtro
Tiene la cefalina.
4) Secado
Cefalina, sólido
Se dispersar el sólido en el papel de filtrado para que así se seque de forma uniforme.
Se pesa.
Se lleva al horno para que se seque y se deja de 30 a 40 min.
Pesar de nuevo.
Lecitina, líquido
Se pesa.
Este se lleva a un baño serológico, así, de esta forma se evaporarán los solventes utilizados. Se deja 10 minutos.
Pesar de nuevo.
Segunda parte: Determinación de indice de yodo: presencia de insaturaciones
1) Yodo
Se pone en un tubo de ensayo 2mL de la muestra lipídica.
Se le agregan 4 gotas de lugol a la muestra y se agitan para que quede homogénea.
Se flamea aproximadamente por 2 minutos.
Se deja enfriar.
2) Almidón
Cuando la muestra esté fría, se agregan 10 gotas de solución de almidón.
Se observa si tiene colocación azul, esta colocación indica que todavíá hay yodo que no a reaccionado con los lípidos.