PROCESO MICROBIOLOGICO

Reproduccion del medio

Pesar la cantidad necesaria correspondiente
al volumen del medio que se elaborara, siguiendo
las instrucciones del fabricante

Integrar el medio pesado en el matraz,
añadir el volumen requerido de agua
destilada requerido.

Si el medio es liquido agitar hasta obtener
su completa disolución. Si el medio es es solido
se calentara y agitara el hasta que se derrita. Se
puede observar que la turbidez desaparece.

El calentamiento se puede realizar con un
termo agitador magnético o usando un trípode y un mechero bunsen . Retirar el medio cuando llegue a ebullición

Colocar un tapon de algodon graso y recubrir con
papel aluminio y esperar a que enfrie.

Prender mechero para esterilizar placas petri
y matraz ( utensilios)

Retirar el tapón de algodón y recubrimiento para
esterilizar los utensilios

Vertir el medio en las placas ya esterelizadas y
esperar que solidifique

Aislamiento de cultivo

Tomar una placa petri y rotular
una cepa.

Seleccionar una colonia aislada,
esterilizar el asa de siembra hasta
que encandezca.

Enfriar el asa sobre la placa donde no
haya crecimiento de cultivo.

Seleccionar una colonia

Hacer una estria en 1/4 de la placa

Esterilizar el asa de siembra nuevamente
y repetir el proceso de estria y esterilizacion
dos veces mas.

Crecimiento Microbiologico

Medio Liquido:
Se manifiesta por: Formación de
velo, cuando los gérmenes cultivados son
aerobios estrictos, su desarrollo como una
masa de células que flotan en la superficie
de este medio.

Sedimentos: Las células se encuentran
ubicadas en el fondo del tubo, sin embargo
se pueden poner en suspensión si se agitan.

Enturbiamiento: Muchas bacterias se desarrollan
produciendo enturbiamiento a causa de la suspensión de numerosas células en el liquido .

Medio Solido:
Las bacterias microscópicamente durante el crecimiento en un medio solido, al multiplicarse forman masas visibles macroscopicamente denominadas colonias

El aspecto de la colonia tiene relación con diversos
factores como: movilidad de la bacteria, presencia de capsula, variación de color , textura o adherencia al medio. Características de la colonia , tamaño, forma, forma de los bordes, color.

Medio Semisólido:
El método de siembra es por puntura, el desarrollo permite observar el movimiento de las bacterias luego de su incubación.

Puede presentar dos tipos de crecimiento, uno por linea de siembra en este caso se puede deducir que la bacteria es inmóvil ya que se desarrollo en la linea de puntura.
El segundo tipo de crecimiento de los costados y la bacteria se cponsidera mobil ya que crece en todas las direcciones

Fijación, tinción de Gram

Para obserbar las bacterias bajo el
microscopio es preferible teñirlas ya
que el colorante aumenta el contraste,
estos colorantes estan cargados positivamente
y son organicos

La pared celular de la bacterias Gram -
esta constituida por una capa fina de
peptidoglicano y una membrana celular externa.
Mientras que las bacterias Gram+ poseen una
pared celular gruesa conformada por peptidoglicano,
pero no cuentan con membrana celular externa.

La composición química y el contenido de peptidoglucano en la pared celular de las bacteritas Gram + y - determinan y explican las características tintoriales.

TINCION GRAM + Y -

Colocar una muestra de colorante
primario cristal violeta
posteriormente se coloca Lugol, sirve como
mordiente para fijar el colorante e impedir la salida del cristal violeta.
Se añade alcohol para producir decoloración de bacterias Gram negativas.
Por ultimo se añade safranina, sirve como colorante secundario o para teñir bacterias que no pudieron retener complejo de cristal violeta.
Finalmente se lava con abundante agua y se deja secar.