LABORATORIO Nº4

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Influencia del pH en la actividad enzimática Procedimiento: l. Recoja 6 ml de saliva en un beaker de 50 mi. 2. Coloque una gradilla con 3 tubos de ensayo numerados del 1 - 3 3. Adicione en cada uno las cantidades que se indican a continuación:  Tubo Nº 1: 2.ml de saliva+ 2 ml de Buffer fosfato 0. IM a pH 3  Tubo Nº 2: 2 ml de saliva+ 2 mI de Buffer fosfato O. IM a pH T  Tubo Nº 3: 2 ml de saliva+ 2 ml de Buffer fosfato 0. lM a pH 11 1. Agite vigorosamente, adicione 2 ml de almidón•al 1% en cada tubo. Agite nuevamente. Y agregue una gota de lugol. 5. Anote el tiempo de desaparición del color en cada pH. Justifique la desaparición del color.

LABORATORIO Nº4

ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

METODOLOGÍA

Hidrólisis del almidón Procedimiento: 1. Coloque una gradilla con 6 tubos de ensayo numerados del 1 - 6 y adicione en cada uno las cantidades que se indican a continuación: Tubo Nº • 1: 2 ml de solución de almidón . Tubo Nº 2: 2 ml de solución de almidón Tubo Nº 3: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva sin diluir Tubo Nº '4: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva sin diluir Tubo Nº 5: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva diluida hervida Tubo Nº 6: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva diluida hervida 1. 2. Coloque Jos tubos en baño María a 37ºC, durante 1 O minutos. 2. En los Tubos .1,3 y 5 adicione.. 1gota de lugol (prueba para almidones) 3. 4. En Jos tubos 2, 4 y 6 adicione .1 ml de reactivo de Benedict (prueba para azucares reductores).

Reconocimiento de catalasa en tejidos animales 1. Se coloca en un tubo de ensayo unos trozos de hígado. 2. Se le añade 2 ml de agua oxigenada.

Reconocimiento de catalasa en tejidos vegetales 1. Se coloca en un tubo de ensayo unos trozos de tomate 2. Se le añade 2 ml de agua oxigenada.

Desnaturalización de la catalasa 1. se coloca en un tubo de ensayo unos trozos pequeños de hígado. 2. se le añade agua y se pone a hervir durante unos minutos. 3. después de ese tiempo se retira el agua sobrenadamente. 4. se le añade agua oxigenada, hasta cubrir los trozos de hígado.

MATERIALES

Reactivos 6 ml de agua oxigenada. 2 ml de lugol al 1% 2 ml buffers fosfato 0.1m a ph. de 3,7,11 2 ml de reactive de benedict Soluciones 20 ml de solución de almidón al 1%

 2.gradillas  15.tubos de ensayo  1.pinza de madera  1.breaker de 50 ml  3 pipetas de 10 ml  1 mechero  1 churrusco para tubos

OBJETIVOS

determinar la presencia de enzimas catalasa en tejidos animales y vegetales.

observar el efecto de diferentes factores sobre la actividad enzimática.

comprobar la accion hidrolitica de la amilasa.