Coloração de Gram
Gram positivas
Possuem em suas paredes espessa camada de peptideoglicano, ácidos teicóicos e polissacarídeos
Ao final do experimento aparecem coradas em roxo ou azul escuro
Permite a diferenciação das bactérias em dois grupos de acordo com sua parede celular.
Gram negativas
Posssuem uma fina cabmada de peptideoglicano e contém uma membrana externa composta por, fofolipídeos; proteínas e lipopolissacarídeos(LPS).
Ao final do experimento aparecem coradas em rosa ou vermelho
Não pode ser ultilizadas para a vizualição de:
Micoplasmas(bactérias sem parede)
Micobactérias(lipídioui
Espiroquetas(muito delgada e pouco permeável)
Reagentes da coloração de Gram:
Cristal violeta(corante primário)
Lugol(mordente)
Álcool(diferenciador)
Fucsina(corante secundário)
Execução:
I-Preparar a lámina com esfregasso bactériano
II-Retire um pouco do cultivo e coloque na lâmina, espalhe bem e deixe secar naturalmente
III-Fixe o esfregasso passando a lâmina três vezes na chama
IV- Faça a coloração cobrindo a lâmina com o esfregasso com cristal violeta, após um minuto, lava com agua e cubra com lugol
V- Após um minuto; lava a lâmina com água e goteja alcool por cerca de 10s e lava bem com água
VI- Cobrir a lâmina com fucsina por 30s e lavar com agua novamente e finaliza secando com cuidado