Introducción a la tecnología del DNA recombinante y a la clonación del DNA
DNA: su estructura está formada por una molécula de doble hélice.
Descubierta por los cientificos James Watson y Francis Crick
A comienzos de los '70 descubrieron dos de los componentes esenciales que hicieron posible las técnicas de clonación de genes y del DNA recombinante.
Enzimas de restriccion (Cortadoras de DNA)
Algunas de sus características:
-Denominadas endonucleasas
-Se encuentran mayormente en bacterias
-Cortan el DNA rompiendo el enlace fosfodiéster
-El sustrato específico para estas enzimas es el DNA
- Hay otros tipos de enzima como la de extremos cohesivos y extremos romos.
El investigador Hamilton Smith, aislo HindIII la primera enzima de restriccion que pudo ser utilizada para clonacion del DNA.
Produjeron el primer vector plásmido para fines de clonación y en 1980 les concedieron las patentes para pSC101.
Plasmido de DNA
Tienen forma circular
DNA auto replicante.
En 1973 Cohen y Boyer trabajaron con dos plasmidos bacterianos para clonar DNA, se puede decir que aqui fue el nacimiento no formal de la tecnologia del DNA recombinante.
Clonación de los genes humanos
Herramientas principales para clonar casi cualquier fuente:
-Enzimas de restricción
-Plásmidos
-DNA ligasa
Esta tecnologia hizo posible cortar y unir casi cualquier fragmento de DNA (insertado)
Si el fragmento de DNA clonado es un gen que codifica un producto proteico, se podrían utilizar las células bacterianas para sinterizar el producto proteico del gen clonado (expresar)
El primer producto genético humano de esta tecnología fue la insulina. Una hormona peptídica producida por células del páncreas, llamadas células beta.
En 1982 la forma recombinante de insulina humana llamada Humulina, fue aprobada por la administración de alimentos y fármacos, para aplicaciones humanas.
Poco después se clono la hormona del crecimiento y una gran variedad de otras proteínas de importancia medica que se pudieron poner a disposición.