Técnicas Cromatográficas

¿Que es?

Es una técnica donde un disolvente interactúa con la sustancia a separar

Consiste

Fase móvil

Se deposita un liquido inmisible

Fase estacionaria

Es el solido o muestra ha analizar

Arreglos experimentales

Cromatografía en columna

Es un método que se utiliza para separar los compuestos de una solución

En esta, una mezcla de solución es llevada por un disolvente a través de una columna que contiene un adsorbente solido, a esto de le llama fase estacionaria

La fase móvil la representaría la muestra

Generalmente se utiliza como reactivo revelador al yodo, el cual forma complejos coloreados al contacto con los componentes orgánicos con tonos amarillo-marrón.

Cromatografía en capa delgada

Esta técnica se basa en la preparación de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido se dispersa sobre una lamina de vidrio o aluminio formando un lecho de espesor uniforme

La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido.

La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria

De acuerdo a esto, los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.

Cromatografía en papel

En estas se lleva acabo la separación e identificación de iones, trabajando con cantidades mínimas de sustancia.

La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la disolución y evaporando el disolvente.

Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad.

La separación se realiza en función de la afinidad de los solutos con las dos fases,

Las más solubles en agua se quedarán cerca del punto donde se aplicó la muestra

Las menos solubles en agua y más solubles en el disolvente llegarán más lejos.

Fuerzas que actúan en las moléculas

Fuerzas de dispersión de London

Interacciones de dipolo inducido

Ventajas

Es una técnica sencilla de hacer e interpretar

Requiere de tecnología barata y de fácil acceso

Se puede colorear el resultado para mejores resultados

¿Qué es?

Técnica de separación y análisis de mezclas de sustancias volátiles

Consiste

Fase estacionaroa

Fase móvil de gas inerte

Caracterización

No interacciona con las moléculas del analito

Transporta el analito a través de la columna

Derivados

Cromatografía Gas-Líquido GLC

Herramienta para realizar separaciones

Factores de selectividad

Proporcionar un medio para llevar a cabo un análisis

Índice de retención

Cromatografía Gas-Solido GCS

Se basa en la adsorción de sustancias gaseosas sobre superficies sólidas

Tamices moleculares

Polímeros porosos

Fuerzas que actúan en las moleculas

Fuerzas de dispersión (fuerzas de London)

Fuerzas de inducción (fuerzas de Debye)

Fuerzas de orientación (fuerzas de Keesom)

Fuerzas donador-aceptor

Ventajas

• Alta resolución

• Velocidad

• Buenos resultados cuantitativos

• Mide nano gramos

• Sensibilidad

Equipo

• Fuente de gas

• Sistema de inyección

• Sistema de detección

• Sistema de registro

• Horno y columna cromatografica

¿Qué es?

Técnica utilizada para la separación de compuestos orgánicos semi-vólatiles.

Consiste

Fase estacionaria no polar (columna)

Fase móvil

Portador de la muestra

Caracterización

Partículas de la fase estacionaria son pequeñas (um).

Permite una mejor eficiencia

Fuerzas que actúan en las moléculas

• Fuerzas de dispersión de London

• Interacciones dipolo

• Interacciones por puente de hidrógeno

• Interacciones dieléctricas

• Interacciones electroestáticas

Ventajas

• Amplio rango de aplicabilidad

• Alta precisión en sus resultados

• Fácil manipulación de los gradientes

• Tiempo de separación menor a 30 min

• Alta reproducibilidad en los análisis cuantitativos

• Alto poder de separación con detección sensible.

• La operación es flexible, personalizable y automatizada.

Equipo

•Reservorio

Están hechos a base de vidrio

Dentro de esta la fase móvil

Mezcla de sustancias polares y no polares

•Bomba

Succiona la fase móvil del reservorio para hacerla fluir por el sistema a una velocidad precisa y contante.

•Inyector

Permite que la muestra sea introducida en la fase móvil

•Horno (columna)

Se encarga de regular y mantener la temperatura dentro de la columna

•Detector

Capta los cambios en los efluentes de la columna y los convierte en señales eléctricas, las cuales son recibidas por el registrador.

•Registrador

Recolecta y procesa las señales recibidas del convertidor para su posterior lectura e interpretación

Modo de Operación

Fase Reversa

La fase estacionaria es hidrofóbica mientras que la fase móvil es un líquido polar, normalmente una mezcla de agua-metanol o agua-acetonitrilo

Par Ion

Se emplea cuando se tienen compuestos iónicos (bases y cationes)

Los iones son neutralizados y separados como un par de iones en una columna de fase reversa o norma con la adición de contraiones lipofílicos.

Fase Normal

Separa los analitos con base en su polaridad. La fase estacionaria (usualmente sílice) es polar, mientras la móvil es no polar.