Procedimiento para llegar al UROCULTIVO
Procesamiento de la muestra
Tipo de Muestra
Tipo de recolección
Chorro medio, punción suprapúbica, sonda (punción, sonda nueva).
Examen directo
Macroscópico
Olor
Color
Aspecto
pH
Densidad.
Microscópico
Sedimento (placa en fresco)
centrifugar la orina a 3000 rmp x 10min
Colocar el una placa y observar al microscopio
Interpretación
Presencia de 5 o más leucocitos por campo, es signo de piuria
Cilindros leucocitarios en una muestra en la que se ha identificado
un germen con recuento significativo, sugiere posibilidades de pielonefritis
Gran cantidad de células epiteliales escamosas, evidencia contaminación
y la necesidad de repetir la muestra
Placa con coloración GRAM
Colocar una gota en una placa dejar secar y fijar
Realizar la coloración GRAM
Interpretación
La observación de una o más células microbianas por campo de inmersión se presenta
en muestras con contajes mayores de 100.000 colonias/ml de orina, acompañadas
generalmente por al menos un leucocito cuando existe piuria.
La presencia de muchas células epiteliales escamosas así como de una flora vaginal
mixta, evidencia contaminación y la necesidad de repetir la muestra
Cultivo
Siembra
1. Mezclar cuidadosamente la orina
2. Con el asa calibrada estéril y fría tomar una asada completa de orina y poner sobre la superficie del agar
3. Diseminarla sobre la superficie de la placa desde el centro, formando una línea y posteriormente hacer estrías sobre la placa cruzando la línea del inóculo varias veces
Incubar
A 37°C x 18 a 24 horas
Interpretación de resultados
Cultivo que no demuestre crecimiento descartarlo
Reporte
Sin desarrollo
Identificación del patógeno
Diagnostico de Staphylococcus:
Partir del Agar Sangre
Colonias pequeñas blanquesinas o amarillentas (doradas) pueden o no presentar beta hemólisis
Realizar coloración GRAM
Observar
Cocos Gram-positivos, redondos, agrupados en racimos
Realizar prueba de Catalasa
Negativa
Positiva
Prueba de Coagulasa
Positiva
S. aureus
Negativa
S. epidermidis
S. saprophyticus
otros
Prueba de resistencia a la Novobiocina
S. epidermidis
Resistente a lo novobiocina
S. saprophyticus
Sensible a lo novobiocina
1. Sembrar las colonias sospechosas en agar Muller Hinton Agar
2. Ponser el en el centro de la siembra un disco de Novobiosina
3. Incubar aeróbicamante a 36°C por 24 horas
4. Lectura de los halos
Manitol
Positivo
S. aureus
Diagnostico de Streptococcus:
Tomarse en cuenta si se presenta en conteos altos y en cultivo puro.
Partir del Agar Sangre
Se observa colonias con alfa hemolíticas
Realizar coloración GRAM
Cocos gram-positivo ligeramente alargados y agrupados en cadenas cortas o parejas
Prueba de Catalasa
Positiva
Negativa
Prueba de sencibilidad a la Bacitracina
Identificar S. pyogenes (Grupo A)
1. Sembrar las colonias sospechosas en agar Sangre (en toda la caja)
2. Colocar en el centro de la siembra un Taxo A
3. Incubar 24h a 36°C aeróbicamente
Interpretación
Sensible
S. pyogenes
No antibiograma
Resistente
Pruena de CAMP
1. Estriar S. aureus (cepa 681) en el centro de una baja de agar sangre en linea horizontal
2. Estriar las colonias sospechosas en linea verticar en ángulo recto ala estría de S. aureus (no tapar)
3. Incubar 18 - 24h en CO2 (5-3%)
Resultado
Negativo
No se observa ninguna "punta en flecha"
Positivo
Se observa una zona clara de beta hemólisis en forma de "punta de flecha" entre las estriaiones de S.aureus y Streptococcus grupo B
Streptocococcus beta hemolítico grupo B
Hidrólisis de Bilis Esculina
1. Inocular las colonias sospechosas en el fondo y la superficie del medio Bilis Esculina
2. Incubar aeróbicamnete por 18-24h a 36°C
Resultado
Negativo
No hay cambio de color
Positivo
Streptococcus grupo D
Diagnostico de Pseudomonas.
Tomar las colonias sospechosas y realizar
Coloración Gram
Bacilos Gram-negativos, rectos o ligeramente curvos, no formadores de esporas, no encapsulados
Prueba Catalasa
Positiva
Prueba de Oxidasa
Positiva
Pruebas bioquímicas
TSI: K/K
Motilidad: motil
O/F: O (+) F(-)
En agar sangre, Mac Conkey producen un olor dulzón semejante a jugo de uvas o de maíz
Agar Sangre --> Algunas colonias presentan hemólisis, son redondas y lisas
Agar MacConkey --> colonias grandes incoloras (lactosa negativo)
Diagnostico de Enterobacterias
A partir de las colonias sospechosas realizar
Coloración GRAM
Pruebas bioquímicas
TSI
LIA
MIO
INDOL
CITRATO
UREA
RM/VP
MOTILIDAD
Preferentemente partir del agar MacConkey
MEDIOS
MacConkey
Sangre
EMB
CLED