Identificación de metabolitos secundarios con 1g de extracto

Adicionar 15 mL de H2O:
etanol (7:1), calentar a
~60°C y filtrar

Tomar 1 mL de filtrado
en un tubo de ensayo

Adicionar 1 mL de tolueno.
Agitar y dejar en reposo.

Fase orgánica

1 mL de H2O.
Agitar.

Adicionar 1mL NaOH al
5% que contiene 2% de
NH4OH

Trasferir el filtrado
en un tubo de ensayo
de 20mL

Adicionar 1 mL de H2SO4
al 50% y 1 ml H2O2 de 20
volumenes.

Calentar en un baño de
agua hirviendo, enfriar
y filtrar

Realizar extracción con 2
porciones de tolueno de 5mL

Fase orgánica

Deshidratar con sulfato
de sodio anhidro, filtrar y
concentrar

ADICIONAR ~1mL DE
NaOH AL 5% QUE CONTIENE
2% DE NH4OH. AGITAR.

REALIZAR CROMATOGRAFÍA
EN CAPA DELGADA

Fase acuosa

Añadir 15 mL de H2O:EtOH (7:1), filtrar
si es necesario y transferir solución a
embudo de decantación

Extraer con 2 porciones de 10 mL
de AcOEt : MeOH (8:2)

Fase acuosa

Fase orgánica

Concentrar, transferir y llevar a
sequedad

Disolver la muestra raspada
en vial en 0,5 mL de MeOH

REALIZAR CROMATOGRAFÍA
EN CAPA DELGADA

Redisolver el residuo en
5 mL de EtOH:H2O (1:1) y
dividir en 4 tubos de ensayo

REALIZAR PRUEBAS DE TUBO

Adicionar 2-3 ml NH4OH conc. En
cabina de extracción

Adicionar 50 ml cloroformo

Calentar a 40 ⁰C y filtrar

Filtrado

Extraer con 2 X 10
ml H2SO4 1 N en embudo
de decantación

Fase acuosa

Alcalinizar con 2 ml NH4OH
y extraer con CHCl3

Fase acuosa

Fase orgánica

Secar con sulfato de sodio
anhidro/Filtrar

REALIZAR PRUEBAS DE
PRECIPITACIÓN EN 5 TUBOS
DE ENSAYO

REALIZAR CROMATOGRAFÍA
EN CAPA DELGADA

Revelar con Dragendorff
para CCD

Fase orgánica

Residuo

Dispersar en 20 ml
H2O-EtOH 7:1 y calentar

Adicionar 20 ml de acetato de plomo
4% en 0,5% de ácido acético

Calentar a ebullición
y filtrar

VERIFICAR
PRECIPITACIÓN
DE CLOROFILAS

Dejar enfriar, transferir
a embudo de decantación
y extraer con Cloroformo:Metanol
(90:10)

Fase orgánica

Deshidratar con sulfato de sodio
anhidro, filtrar y concentrar

REALIZAR PRUEBAS:
XANTHIDROL Y KEDDE

REALIZAR CROMATOGRAFÍA
EN CAPA DELGADA

Fase acuosa