Manejo y cuidado del microscopio

¿Qué es?

El nombre deriva etimológicamente de dos raíces griegas:
mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que significa observar. Por lo tanto, un microscopio es un instrumento que
sirve para observar objetos o estructuras pequeñas. Amplifica estructuras microscópicas que se pueden observar y nos da detalles de su estructura, donde se pueden visualizar por debajo de 250 μm, el poder de resolución del ojo humano.

Historia

Origen de la microbiología

Durante mucho tiempo se sospecho de la existencia de criaturas demasiado
pequeñas para ser observadas a simple vista

Anton van Leeuwenhoek

Observaba toda clase de objetos, dibujaba y
describía con gran precisión. Observó capilares, bacterias.

Siglo XVIII

El microscopio tuvo varios adelantes mecánicos pero no mejoraros sus lentes

Siglo XIX

Se generalizo el uso del microscopio, permitiendo conocer el alcance y naturaleza de los microorganismos.

Siglo XX

Empiezan a surgir nuevos modelos de microscopios

Topic principal

Tipos de microscopio

Compuesto

DE CAMPO CLARO - La muestra se ve mediante transiluminación, de manera que la luz procedente del condensador atraviesa la muestra. - La imagen muestra puntos o áreas iluminadas (generalmente coloreados) sobre un fondo claro o transparente. - Las muestras deben ser teñidas para que se observen. - Es posible colorear a las bacterias con una variedad de tinciones, incluyendo el azul de metileno, el cristal violeta (violeta de genciana), la fucsina carbol (rojo) y la safranina (rojo).

DE CAMPO OSCURO - La imagen que se forma está constituida por una serie de
estructuras brillantes sobre un fondo oscuro. - El microscopio de campo oscuro se emplea para ver células vivas en las cuales no se han aplicado sustancias fijadoras ni colorantes. - Los rayos de luz oblicuos que inciden forman un halo luminoso brillante alrededor de las estructuras.

ESTEREOSCÓPICO - Permite observar la muestra en forma tridimensional. - Observan la muestra a través de dos lentes distintas, esto permite que la imagen que llega a cada ojo sea ligeramente distinta.

CONTRASTE DE FASES - Microscopio fotónico más utilizado para observar objetos o
estructuras transparentes sin teñir. - Facilita la observación de células vivas para distinguir y analizar sus componentes morfológicos y ciertas funciones que ellas puedan desarrollar (fagocitosis, mitosis, movimientos ameboideos, ciliares o flagelares, etc.)

INVERTIDO - Tiene una disposición inversa de sus componentes, el condensador y la luz están en la parte de arriba hacia la platina y los objeticos se dirigen hacia arriba. - Permite observar imágenes directamente en cultivo,
sin necesidad de laminilla.

FLUORESCENCIA - La luz emitida se
observa en forma de destellos coloreados sobre un fondo oscuro. - Emplea muestras teñidas con fluorocromos lo que permite visualizar la muestra con
fluorescencia bajo luz ultravioleta. - Se utiliza para la búsqueda de antígenos y/o anticuerpos

CONFOCAL - La iluminación de la muestra con un delgado rayo laser
concentrado en un foco que recorre con rapidez, punto por punto, todos los componentes del espécimen, a una profundidad microscópica constante. - Da imágenes tridimensionales.

Electrónico

MEB (Microscopio electrónico de barrido) - Los electrones no atraviesan el espécimen para
formar las imágenes. - Sirve para observar la superficie constituida por una serie de diminutos relieves, sinuosidades, depresiones, grietas y prominencias, tal como se exhiben en estado viviente. - La imagen es impregnada en metal. - Amplifica la imagen de 15 – 100.000 veces

MET (Microscopio electrónico de transmisión) - Reproduce imágenes muy amplificadas de cortes ultradelgadas de tejidos u otras muestras. - Se forma la imagen con zonas iluminadas o claras denominadas electronlúcidas, y otras oscuras o electrondensas

¿Cómo conseguir un enfoque?

1. El objetivo de menor aumento debe quedar aproximadamente a un centímetro de la platina.

2. Centrar la preparación colocando la muestra en el centro de la abertura de la platina

3. Se baja lentamente el tubo, con el tornillo macrométrico hasta que la imagen aparezca y con ayuda del tornillo micrométrico se logra una imagen nítida.

4. Se pasa a la utilización de un objetivo, a otro de mayor
aumento.

5. Cuando se requiera usar el objetivo de inmersión, se coloca una gota de aceite en el centro de la preparación.

6. Cuando se termine de usar, bajar la platina para retirar la preparación.

7. Limpiar los objetivos y dejarlos en el menor aumento

Sistemas del M.O:

Óptico

OBJETIVOS Estos sistemas de lentes establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para captar los detalles
de la misma (poder de resolución). Constituidos
por 2 lentes convergente y divergente.

CAPACIDAD DE AUMENTO: capacidad de la lente para que se vea un objeto más grande. Es igual al n° de veces que va a ser aumentada la imagen.

APERTURA NUMÉRICA: Es una medida que indica la capacidad del objetivo de poder captar los rayos refractados por las estructuras finas de las cuales está constituido el objeto que se observa.

PODER DE RESOLUCIÓN: Capacidad de una lente para mostrar 2 objetos muy cercanos como distintos y separados.

LÍMITE DE RESOLUCIÓN: Es la distancia mínima a la que tienen que estar dos puntos para que en la imagen se perciban separados uno de otro.

CONDENSADOR Tiene como función principal concentrar y regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa. Está formado por una o dos lentes convergentes que reúnen los rayos y los orientan hacia la abertura central de la platina.

OCULARES Debe su nombre debido a que la imagen final se observa a través de él acercando el ojo a la lente “ocular” del componente. Forma una segunda imagen a partir de la
imagen primaria que forma el objetivo. Esta imagen únicamente amplía un número determinado de veces (5x, 8x, 10x, 12x).

Mecánico

BASE O PIE: Es un soporte metálico, amplio y sólido en
donde se apoyan y sostienen los otros componentes del
microscopio.

COLUMNA: Soporta al condensador y al diafragma y une la platina a la base.

BRAZO: Continuación de la base o pié y permite sujetar el microscopio con la mano.

PLATINA: Superficie plana de posición horizontal, en ella se apoya la preparación (lámina, muestra que se va a examinar).

TUBO ÓPTICO: sostiene los objeticos y los oculares.

PINZAS: Fijan las laminillas a la platina.

REVOLVER: Permite la rotación de los obejtivos

TORNILLO MACROMÉTRICO: produce desplazamientos
rápidos de la platina.

TORNILLO MICROMÉTRICO: Produce movimientos imperceptibles de la platina y sirve para efectuar el enfoque fino y definitivo de la imagen.

Iluminación

FUENTE DE LUZ: Las fuentes
de energía luminosa son de dos tipos natural y artificial.

ESPEJO: lo requieren los microscopios que trabajan con lampara externa

CONDENSADOR: dirige y concentra el haz luminoso en la preparación.

DIAFAGMA: regula la entrada
de luz, para concentrar la mayor
cantidad de rayos luminosos en el plano donde está situado el objeto a observar.