Esquema Serología

El semen es un liquido
viscoso y opalescente
de color blanco grisaseo

Su pH es de 7.36 a 8,
también contiene sustrato
para la coagulación.

Este sustrato posee:
enzimas licuantes,
hormonas, fosfatasas,
acidas, espermina,
ácido cítrico, lípidos, proteínas
zinc, antígeno soluble, etc.

Materiales necesarios:
Tubos de ensayo de 15cm L y 1cm A,
Hisopos de madera 15cm L,
Laminillas porta objeto y
Ampolletas de solución salina.

Para la recolección de una
muestra se necesitaran recolectar
3 veces el frotis dubitable

Primera:
Se usa el hisopo para recolectar
el frotis, después se coloca sobre
una laminilla porta objetos, la cual
se le pasara una flama por debajo,
así mismo el hisopo con el que se
recolecto se colocara en un tubo de
ensayo con 2ml de solución salina.

Segunda:
Primero se humedece el hisopo
con solución salina, después se
recolectara la muestra y se pondrá
el hisopo en un tubo de ensayo.
(cuantificación de la fosfatasa ácida)

Tercera:
Se tomara con idénticas condiciones a la
primera toma y servirá para aclaraciones o
confrontas.

Todas las muestras tomadas llevaran lo siguiente:

Etiquetas con el numero de expediente, fecha y hora
en que se recolecto, nombre de la persona a la que
se le tomó, nombre del investigador que lo recolecto.

Fosfatasa ácida como medio de
identificación

La identificación de fosfato
ácida solo servirá como orientación
ya que no solo el semen contiene
fosfato ácido.

REACTIVO:
Solución 1, Orto Dianisidina tetrazotizada
1gr; Acetato de sodio 20gr; Acido acético
10ml; agua destilada 100ml.
Solución 2, naftil fosfato de sodio
.8gr; agua destilada 10ml.
Mezclar 10ml de solución 1;89 ml, de agua
destilada y 1.0ml de la solucion 2 en frasco
ambar.

PROCEDIMIENTO.
La dubitable se coloca entre 2 hojas de
papel filtro, se coloca sobre una lamina de
vidrio donde previamente se puso testigo
negativo, positivo y muestra problema,
después se agregan 10 gotas de reactivo
con una pipeta pasteur.

Interpretar resultados
Aparecerá la coloración violeta intensa
en la muestra problema dentro de los 5min
siguientes

Descripción del espermatozoide

El liquido espermático humano contiene de
70 a 150 millones por ml; cuenta con una
cabeza oval que mide 4.6 X 2.6 X 1.5 micras,
una pieza intermedia que contiene mitocondrias,
y una cola formada por 9 filamentos

Debido a que las bacterias atacan su tallo
se hace difícil su identificación por lo cual
es importante su pronta recolección, suelen
sobrevivir de 30min a 12hrs, y en el útero
de 4 a 6 días.

Técnica de tinción

Tecnica gram:
Por este procedimiento la cabeza se tiñe de color
rosa y el cuerpo color azul.

REACTIVOS:
Solución A, crystal violeta 2gr, alcohol etílico absoluto 20ml.
Solución B, Oxalato de amonio 0.8 gr, Agua destilada 80ml.
Mezclar soluciones A y B y embazar en frasco ámbar.
Solución 2 iodo iodurada, Iodo metálico 1gr, Iodo de potacio 2gr, agua destilada 300ml.
3 Decolorante, Alcohol etílico absoluto (95%).

4 Colorante de safranina, safranina (2.5% alcohol etílico) 10ml, agua destilada 100ml

El frotis se seca ligeramente con el calor de un
mechero.
a) Se añade el reactivo de cristal violeta durante 1 min.
b) Lavar con agua destilada
c) Cubrir nuevamente con la solución 2 durante 1 min; tirar el exceso de lugol y decolorar con agitación utilizando el reactivo 3 durante 30 seg.
d) Secar con papel filtro y cubrir la reacción con el
reactivo 4; dejarlo actuar de 10 a 30 seg.
e) Lavar con agua destilada y observar con el microscopio.