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von Sarah Moretto Vor 9 Jahren

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Mapa conceitual 2; alunos: Helena Trevisan, Sarah Moretto, Rodrigo Fontoura, Carolina Souza (M3)

O processo de diferenciação in vitro envolve a utilização de tecido adiposo lipoaspirado, que após ser lavado com solução salina, tem suas células-tronco mesenquimais retiradas. Estas células são então cultivadas em um meio específico, como DMEM com 10%

Mapa conceitual 2; alunos: Helena Trevisan, Sarah Moretto, Rodrigo Fontoura, Carolina Souza (M3)

diferenciação in vitro

tecido adiposo lipoaspirado

lavagem com solução salina
retirada de células tronco mesenquimais

cultivo em meio DMEM + 10% soro fetal bovino (SFB)

DMEM + SFB + indometacina + insulina + dexametasona

indução adipogênica

fotodocumentação com Vermelho de Nilo

dexametasona + kit de diferenciação osteogênica da StemPro

indução osteogênica

fotodocumentação com reagentes do kit Lonza

Tecido adiposo

multilocular (marrom)

apenas em mamíferos
hibernantes

diminui com o tempo

recém natos
produção de calor
é vascularizado e inervado
adipócitos multiloculares
pequenas gotas de lipídio
núcleo esférico

unilocular (amarelo)

encontrado na hipoderme
presença de capilares
armazena energia
lipogênese
libera energia
lipólise
adipócitos uniloculares
uma gota grande de lipídio
núcleo achatado periférico

diferenciação in vivo

pré-adipócitos

sofrem adipogênese

outros reguladores

atuam também como ativadores/inibidores de sequências de reação

ácidos graxos não esterificados

ativadores/ligantes de

ácidos graxos de cadeia longa

reguladores transcricionais

gene da proteína ligadora de lipídeos do adipócito (ALBP)

precisam ser metabolizados

efetivos

ácido ARA

induz adipogênese indiretamente

componente adipogênico no soro bovino fetal

estágios iniciais da diferenciação

induzem a formação de adipócitos

indiretamente

diretamente

sinalizador em receptores

reguladores centrais do processo adipogênico

C/EBP-α

ausência de PPARy

não promove adipogênese

adipócito imaturo -> adipócito maduro

PPARγ

pré-adipócito -> adipócito imaturo

tecido conjuntivo de propriedades especiais

adipócitos
acúmulo de lipídios

triglicerídios

matriz extracelular
fibras reticulares

colágeno tipo III

Tecido ósseo

Composição

Células
Osteoprogenitoras

indiferenciadas

alongadas

Osteoblastos

síntese de matriz extracelular

Osteócitos

células maduras

possuem junções comunicantes

canalículos

Osteoclastos

grandes e multincleadas

degradam e reabsorvem o tecido ósseo

Matriz extracelular
Orgânica

colágeno tipo I

resistência

Inorgânica

sais minerais cristalizados

dureza

Ossificação

algumas características moleculares
diferenciação de monócitos em osteoclastos

dois eventos de sinalização

interação M-CSF - c-fin

interação RANKL-RANK

diferenciação do fibroblasto em osteoblasto

fatores de transcrição específicos

Cbfa1/Runx2

alguns reguladores endógenos

membros da superfamília do TGF-b

fator de crecimento Gdf5

proteínas morfogenéticas ósseas (BMP 5 e BMP 7)

genes do fator de crescimento transformante-B
condensações de células mesenquimais
intramembranosa

interior de tecido mesenquimal

secreção de matriz

tecido osteóide

deposição de fosfato de cálcio

trabéculas

ossos chatos

endocondral

substitui esqueleto cartilaginoso fetal

diáfise

calcificação da matriz

penetração de vasos sanguíneos e células mesenquimais

diferenciação em osteoblastos

diferenciação em osteócitos

espículas ósseas

ossos longos e irregulares

canal medular

células mesenquimais

medula óssea hematogênica

células tronco adultas hematogênicas

ao redor da diáfise

pericôndrio

produção de osso

Camadas

externa
periósteo

tecido conjuntivo denso modelado

interna
endósteo

células osteoprogenitoras

Células-tronco

Adultas

são tecido-específicas
células tronco mesenquimais

origem estromal

em qualquer tecido

tratamento de doenças não hematológicas

células tronco hematológicas

tratamento de doenças hematolícas

fatores de sinalização
localização em nichos específicos e características intrínsecas

definem seu potencial de diferenciação

multipotentes

em células do seu folheto embrionário de origem

capacidade de autorrenovação
divisão

célula progenitora

célula tronco

embrionárias

potencial terapêutico
muito restrito

devido a questões de segurança

caracterização molecular
fatores de transcrição

permanência da célula em estado indiferenciado

NANOG,POU5F1,SOX2 e SALL4

genes relacionados com a pluripotência

OCT-4,REX-1,SOX-2,NANOG,LIN28,THY-1 e SSEA-3 e 4

expressam proteínas

CD9,CD-24 e fosfatase alcalina

obtenção
camada interna do blastocisto
pluripotentes
diferenciação

células de qualquer um dos três folhetos embrionários

mesoderme

ex: tecido conjuntivo e ósseo

ectoderme

ex: sistema nervoso central e periférico

endoderme

ex: revestimento epitelial dos tratos gastrointestinal e respiratório