Espectroscopia Absorción Molecular

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Espectroscopia Absorción Molecular

Espectroscopía Infrarrojo:

Detección de adulteraciones en aceites de oliva vírgenes. Confirmación estructural de un compuesto de síntesis.

.Se utiliza guantes y una mascarilla para evitar que la humedad pueda deteriorar la calidad del divisor de haz de luz de bromuro de potasio. .Luego de introducir el divisor de luz, se debe sellar el instrumento para evitar señales del exterior como pueden ser las de vapor de agua o dióxido de carbono. .Mantener la temperatura baja (77 K = -196°C) para no afectar la sensibilidad del detector. Esto se hace vertiendo nitrógeno líquido. .Preparado de muestra sólida: AL finalizar se baja la presión de la prensa lentamente y se mantiene unos minutos antes de sacarla. Esto se debe hacer para que la muestra no se fragmente.

a) Instalar el divisor de haz de bromuro potásico b) Se sella el instrumento. c) Se vierte el nitrógeno líquido en su compartimiento d) Se prepara la muestra ya sea sólida, liquida o gaseosa e) Se inserta la muestra en el compartimiento. f) Se sella el compartimiento de muestra para hacer vacío y trabajar a baja presión. g) Se hace el proceso de acumulación de interferogramas, para tener espectros. (Lo hace la computadora) h) Los espectros son promediados, para obtener un espectro con una relación señal ruido mejor.

La absorción de energía de radiación infrarroja por los enlaces de una molécula, generando en ésta deformaciones y dando como resultado transiciones de energía vibracional en lugar de transiciones electrónicas (las cuales se producían al absorber energía en el espectro uv-vis). Una molécula absorberá la energía de un haz de luz infrarroja cuando dicha energía incidente sea igual a la necesaria para que se produzca una deformación producto de una transición vibracional.

Espectroscopía UV/Visible:

Lectura de absorbancia:

Solución de cafeína.

.Al introducir la celda se debe hacer de tal modo que la parte más clara quede de cara al haz de luz. .El equipo debe estar calibrado.

a)Encender el espectrofotómetro y permitir que se estabilice. b)Seleccionar la longitud de onda de máxima absorción para la solucion a trabajar. c)Calibrar a cero el equipo con la solución blanco (una disolución que contiene todos los reactivos utilizados para disolver la sustancia de interés y que no contenga el compuesto a determinar). d)Realizar la medición de la absorbancia para la solución a trabajar y para la solución de concentración desconocida y anotarla en una tabla. e)Realizar la curva de calibración para la solucion a trabajar calcular la concentración en la muestra problema.

La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io. Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces A vale log 1 = 0. Ia It Io l 3 La cantidad de luz absorbida dependerá de la distancia que atraviesa la luz a través de la solución del cromóforo y de la concentración de éste.

Barrido espectral:

Ejemplos de muestras a analizar

Soluciones de permanganato de potasio. Soluciones de cafeína.

Precauciones

Error sistemático. Error aleatorio.

Procedimiento

a)Encender el espectrofotómetro y esperar que se estabilice. b)Seleccionar el rango de longitud de onda de trabajo c)Colocar en la cubeta el blanco (una disolución que contiene todos los reactivos utilizados para disolver la sustancia de interés y que no contenga el compuesto a determinar). Limpiar externamente la cubeta y colocarla en el espectrofotómetro. d)Ajustar la absorbancia a cero. e)Seleccionar una de las soluciones de permanganato de potasio y llenar una cubeta, la cual debe estar limpia y seca. f)Colocar la cubeta en el espectrofotómetro y realizar el barrido espectral. g) Analizar el espectro de absorción obtenido y anotar la longitud de onda donde se observa el máximo de absorción

Fundamento de las técnica

El objetivo de esta experiencia es hallar la longitud de onda a la cual se produce la máxima absorción del analito a determinar. Una representación gráfica muestra la variación de la absorbancia de una molécula en un rango de longitudes de onda.El gráfico obtenido del barrido espectral de una molécula nos permite obtener información que contribuya a la identificación estructural de la molécula.