Unidad 1: Microscopia

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Unidad 1: Microscopia

Microscopio óptico (tipos)

Estos pueden ser de las siguientes maneras:

De fluorescencia

Moléculas absorben energía > Esta se excita > Liberan energía

Expone la muestra a luz UV y forma la imagen con la luz fluorescente emitida

*Se observa a partir de la emisión de la luz de una muestra

De contraste de fases

*Convierte diferencias pequeñas en el indice de refracción

*Se basa en las diferencias que hay en los indices de refracción

*Mejora la diferencia de contrastes entre células y el medio que las rodea

De campo oscuro

*Mayor resolución: Facilita el observar estructuras internas

*Cambia la forma de iluminación: Sólo entra al objetivo la luz reflejada por la muestra

*Se fijan y se tiñen los microorganismos por lo tanto se mueren antes de observar

De campo claro

*Difícilmente se pueden visualizar microorganismo no pigmentados

*La muestra se visualiza gracias a sus diferentes contrastes

*Forman una imagen oscura frente a un fondo claro

Microscopio electrónico (tipos)

Existen 2 tipos de esta microscopia

Microscopio electrónico de transmisión (MET)

Se hacen cortes ultra-finos de las células para poder ver detalladamente ciertas estructuras (Ej. Ac.Nucl.)

Microscopio electrónico de barrido (MEB)

Solo se puede ver la superficie de los objetos (muestras)

Aumento y resolución

Resolución

Mayor detalle para distinguir estructuras

Mayor apertura numérica = Mayor resolución

Apertura numérica (propiedad de los lentes)

Longitud de onda de la luz

Aumento

EL aumento total esta dado por el producto de

Aumento el objetivo X aumento del ocular

Lentes y desviación de la luz

*La potencia de la lente esta relacionada con la distancia focal

Distancia focal corta= mayor aumento de un objeto

*La distancia entre el centro de la lente y el punto focal se denomina distancia focal

*Un prisma desvía la luz por que esta incide sobre la superficie del vidrio angulo

*La dirección y la magnitud de la desviación de la luz se determinan por los indices de refracción

Estos son los 2 medios que forman la interfase

*Cuando un rayo de luz pasa de un medio a otro se produce una refracción

El rayo se desvía en la interfase

Tipos de microscopia

Electrónica

Estructuras internas y detalles de superficie

Aumentos de 200'000 a 400'000 veces

Amplificación mediante un haz de electrones (luz) y un campo magnético (lentes)

Óptica

Células intactas

Amplificación sucesiva por una serie de lentes

Aumentos de 100 a 1000 veces