por Liz Bastidas hace 8 años
1931
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MEDIOS
MacConkey Sangre EMB CLED
1. Mezclar cuidadosamente la orina 2. Con el asa calibrada estéril y fría tomar una asada completa de orina y poner sobre la superficie del agar 3. Diseminarla sobre la superficie de la placa desde el centro, formando una línea y posteriormente hacer estrías sobre la placa cruzando la línea del inóculo varias veces
Incubar
Interpretación de resultados
Identificación del patógeno
Diagnostico de Enterobacterias
A partir de las colonias sospechosas realizar
Preferentemente partir del agar MacConkey
TSI LIA MIO INDOL CITRATO UREA RM/VP MOTILIDAD
Coloración GRAM
Diagnostico de Pseudomonas.
Tomar las colonias sospechosas y realizar
En agar sangre, Mac Conkey producen un olor dulzón semejante a jugo de uvas o de maíz Agar Sangre --> Algunas colonias presentan hemólisis, son redondas y lisas Agar MacConkey --> colonias grandes incoloras (lactosa negativo)
Coloración Gram
Bacilos Gram-negativos, rectos o ligeramente curvos, no formadores de esporas, no encapsulados
Pruebas bioquímicas
TSI: K/K Motilidad: motil O/F: O (+) F(-)
Prueba de Oxidasa
Prueba Catalasa
Diagnostico de Streptococcus:
Tomarse en cuenta si se presenta en conteos altos y en cultivo puro.
Se observa colonias con alfa hemolíticas
Cocos gram-positivo ligeramente alargados y agrupados en cadenas cortas o parejas
Prueba de Catalasa
Hidrólisis de Bilis Esculina
1. Inocular las colonias sospechosas en el fondo y la superficie del medio Bilis Esculina 2. Incubar aeróbicamnete por 18-24h a 36°C
Streptococcus grupo D
No hay cambio de color
Pruena de CAMP
1. Estriar S. aureus (cepa 681) en el centro de una baja de agar sangre en linea horizontal 2. Estriar las colonias sospechosas en linea verticar en ángulo recto ala estría de S. aureus (no tapar) 3. Incubar 18 - 24h en CO2 (5-3%)
Resultado
Se observa una zona clara de beta hemólisis en forma de "punta de flecha" entre las estriaiones de S.aureus y Streptococcus grupo B
Streptocococcus beta hemolítico grupo B
Negativo
No se observa ninguna "punta en flecha"
Prueba de sencibilidad a la Bacitracina
Identificar S. pyogenes (Grupo A)
1. Sembrar las colonias sospechosas en agar Sangre (en toda la caja) 2. Colocar en el centro de la siembra un Taxo A 3. Incubar 24h a 36°C aeróbicamente
Resistente
Sensible
S. pyogenes
No antibiograma
Diagnostico de Staphylococcus:
Partir del Agar Sangre
Colonias pequeñas blanquesinas o amarillentas (doradas) pueden o no presentar beta hemólisis
Realizar coloración GRAM
Observar
Cocos Gram-positivos, redondos, agrupados en racimos
Realizar prueba de Catalasa
Positiva
Manitol
Positivo
Prueba de Coagulasa
S. epidermidis S. saprophyticus otros
Prueba de resistencia a la Novobiocina
1. Sembrar las colonias sospechosas en agar Muller Hinton Agar 2. Ponser el en el centro de la siembra un disco de Novobiosina 3. Incubar aeróbicamante a 36°C por 24 horas 4. Lectura de los halos
S. saprophyticus
Sensible a lo novobiocina
S. epidermidis
Resistente a lo novobiocina
S. aureus
Negativa
Cultivo que no demuestre crecimiento descartarlo
Reporte
Sin desarrollo
A 37°C x 18 a 24 horas
Placa con coloración GRAM
Colocar una gota en una placa dejar secar y fijar
Realizar la coloración GRAM
La presencia de muchas células epiteliales escamosas así como de una flora vaginal mixta, evidencia contaminación y la necesidad de repetir la muestra
La observación de una o más células microbianas por campo de inmersión se presenta en muestras con contajes mayores de 100.000 colonias/ml de orina, acompañadas generalmente por al menos un leucocito cuando existe piuria.
Sedimento (placa en fresco)
centrifugar la orina a 3000 rmp x 10min
Colocar el una placa y observar al microscopio
Interpretación
Gran cantidad de células epiteliales escamosas, evidencia contaminación y la necesidad de repetir la muestra
Cilindros leucocitarios en una muestra en la que se ha identificado un germen con recuento significativo, sugiere posibilidades de pielonefritis
Presencia de 5 o más leucocitos por campo, es signo de piuria
Olor Color Aspecto pH Densidad.
Chorro medio, punción suprapúbica, sonda (punción, sonda nueva).
