ELECTROFORESIS

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ELECTROFORESIS

PASO A PASO

Identificación y cuantificación

Lectura

Depende del detector

Puesta en marcha con diferencia de potencial

Conectar la muestra al capilar

Preparar la muestra

Acondicionar el capilar

Limpieza

Entre cada corrida

Antes

¿En que se basa?

Las diferencias de velocidad de desplazamiento de los analitos en un campo eléctrico.

MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA

Que depende de

Fuerza friccional

VELOCIDAD DEL IÓN

RADIO DEL IÓN

VISCOSIDAD DE SOLUCIÓN

Fuerza electrica

CARGA Y CAMPO ELÉCTRICO

¿Qué genera esa velocidad?

EQUIPO

GEL

CAPILAR

Longitud

Diametro

Material

MUESTRA

Solubilidad

Viscosidad

Debida a la temperatura

DIFERENCIA DE POTENCIAL

Voltaje

Modifica

Tiempo de migración

Eficiencia

ANALITO

SU MASA

SU CARGA

NEUTRA

Aplicaciones

Análsis toxicologicos y forenses

Bioquímica clínica

Alimenticias

Farmaceuticas

Biotecnológicas

FENÓMENO QUE APARECE

Flujo electroosmotico

¿Cómo lo controlo?

Solución{on reguladora

pH

Campo electrico

CONTROLA EL TIEMPO QUE PERMANECE UN ANALITO EN EL CAPILAR

debido a la superposición de

MOVILIDAD DEL ANALITO

FLUJO

¿Qué causa?

Movimiento de todas las especies

SUPONEMOS QUE CONECTAMOS PARA QUE EL FLUJO SE MUEVA DE ÁNODO A CÁTODO

Los aniones migrarán lentamente al CÁTODO, debido a que atraidos por el ÁNODO (en el sentido contrario) pero son arrastrados por el FEO hacia el CÁTODO.

Los compuestos neutros serán arrastrados a la velocidad del FEO (pero no serán separados)

Los cationes migrarán rapidamente al CÁTODO, debido a el FEO y la atracción electroforética hacia él

Caracteristica única

Perfil plano dentro del capilar

No genera dispersión del analito

Flujo uniforme

No hay perdida de carga

¿De qué depende?

Permeabilidad del medio

Potenicial zeta

Depende de la carga superficial de la pared del capilar

CARGA DEL CAPILAR

Depende del pH

pH BAJO

FLUJO LENTO

pH CONTROLADO

Subtema

pH ALTO

FLUJO RÁPIDO

Movilidad del FEO

Velocidad del FEO

¿Qué es?

Flujo del liquido dentro del capilar debido a la carga superficial sobre la pared interior del capilar

FEO

CAPA DIFUSA

CAPA DE STERN

PARED

¿PARA QUÉ SIRVE?

Separar y determinar una gran cantidad de analitos