Pruebas Genéticas Diagnósticas

La Bulimia

harold stiven rojas acostaにより

Ley 1438 de 2011

christian muñozにより

ENFERMEDADES DE TRANSMISION SEXUAL (E.T.S)

Carlos Eduardo Diaz Preciadoにより

SALUD OCUPACIONAL EN LA PREHISTORIA E HISTORIA

ADRIANA MONTOYA URIBEにより

Genoma clínico

Detección de variantes de riesgo para enfermedades complejas (diabetes, enfermedades cardiovasculares, Alzheimer).

Diagnóstico de enfermedades genéticas raras y hereditarias.

Análisis bioinformático para identificar variantes genéticas de interés.

Ensambles y alineación de las secuencias contra una referencia del genoma humano.

Secuenciación masiva paralela, que lee cada fragmento de ADN.

Fragmentación del ADN en pequeñas secciones.

Extracción de ADN de una muestra biológica (sangre, saliva o tejido).

Recopila información fenotípica y clínica sobre variantes en todo el genoma y desarrolla enfoques de consenso para identificar su relevancia clínica.

Exoma clínico

Identificación de desórdenes neurogenéticos y neuropsiquiátricos.

Diagnóstico de enfermedades raras.

Identificación de variantes genéticas causantes de enfermedades monogénicas.

Captura y secuenciación de exones.

Técnica de secuenciación genética que se centra en las regiones codificantes del genoma humano, conocidas como exones.

Hibridación genómica comparativa (microarray)

Identificación de duplicaciones o ausencias de pequeñas regiones cromosómicas.

Determinar la posible causa genética de ciertas enfermedades que afectan al desarrollo, como la discapacidad intelectual o el autismo.

Estudio del cáncer.

Diagnóstico prenatal de enfermedades genéticas.

Se determina si hay alguna diferencia en el número de copias de ADN.

Se mezclan las cadenas de ADN de referencia con el ADN problema.

Se marca cada muestra con un fluorocromo diferente.

Se desnaturalizan las cadenas de ADN.

Se aisla el ADN de las muestras.

Analiza las 23 parejas de cromosomas para identificar ganancia o pérdida de material genético.

FISH (Hibridación In Situ Con Fluorescencia)

Útil para detectar alteraciones de los cromosomas en las que hay pérdida o ganancia de material genómico y para fusiones cromosómicas.

Identifica aberraciones cromosómicas clínicamente significativas como un tumor.

En el microscopio, se logrará encontrar la región donde el fragmento se ha unido al ADN por el tinte que llevaba.

El ADN con fluorescencia se pega a su segmento correspondiente en uno de los cromosomas.

Se incuba el ADN con el conjunto de cromosomas del genoma de origen.

Se añade un tinte fluorescente al ADN purificado en sondas.

Se realiza sobre el tejido de interés o en células cultivadas en laboratorio.

Método citogenético que combina el análisis citológico de los cromosomas con un análisis molecular basado en sondas de ADN

Detecta y localiza una secuencia de ADN específica en un cromosoma.

Secuenciación de Nueva Generación (NGS)

Aplicación clínicas

Secuenciación de patógenos para identificar variantes y resistencias.

Permite detectar mutaciones en tumores y seleccionar terapias dirigidas.

Identificación de mutaciones responsables de enfermedades hereditarias.

Análisis bioinformático, donde se ensamblan y comparan las secuencias con el genoma de referencia para detectar variantes genéticas.

Secuenciación masiva paralela, que lee simultáneamente millones de fragmentos de ADN.

Amplificación por PCR en emulsión o en una superficie sólida.

Adición de adaptadores (secuencias cortas de ADN) para la amplificación y posterior secuenciación.

Extracción del ADN o ARN de una muestra biológica.

Tecnología avanzada que permite analizar de manera rápida y precisa grandes cantidades de ADN o ARN.

Secuencia un número determinado y específico de genes que están relacionados con una enfermedad o grupo de enfermedades.

Ligación múltiple dependiente de amplificaciones (MLPA)

Detecta grandes mutaciones en enfermedades genéticas, así como variaciones en el número de copias de secuencias genómicas específicas.

Técnica

La cantidad de cada ampliación de PCR es proporcional al número de copias de la secuencia objetivo en la muestra de ADN.

Cada sonda amplificada tiene una longitud única, lo que permite su visualización y cuantificación mediante electroforesis capilar.

Estas sondas se ligan y luego se amplifican mediante PCR utilizando un único par de cebadores.

Implica el uso de sondas que consisten en dos oligonucleótidos que se hibridan adyacentes a una secuencia de ADN objetivo.

Técnica de análisis de número de copias que permite la cuantificación simultánea de hasta 60 secuencias de ADN genómico en una sola reacción de PCR multiplexada.

SECUENCIACIÓN DE SANGER

Detecta variantes familiares, valida resultados de secuenciación masiva y realiza ensayos de secuenciación de un solo gen.

Ténica

Se combina las cuatro electroforesis y se establece el orden de la cadena complementaria diana.

El resultado de cada reacción se somete a electroféresis.

Se detiene la síntesis y la nueva cadena se suelta.

Comienzo de la reacción de la ADN polimerasa que va añadiendo nucleótidos marcados hasta que inserte un didesoxinucleótido.

Separación de las dos cadenas del ADN.

Propiciar síntesis de nuevas cadenas de ADN aumentando la temperatura de las reacciones.

Se añade a cuatro reacciones diferentes:

Didesoxinucleótido

Uno de los cuatro nucleótidos (A,C, T y G)

Primer específico

ADN polimerasa

Amplificación del ADN mediante una PCR.

Método de laboratorio que determina la secuencia de nucleótidos de una porción de ADN.

Se basa en la incorporación de didesoxinucleótidos de terminación de cadena (ddNTP) en la replicación del ADN.

CARIOTIPO

Aplicación clínica

Diagnóstico prenatal temprano de problemas cromosómicos y enfermedades genéticas.

Técnica

Fijación y análisis en portaobjetos.

Lisis de membranas con solución hipotónica. de KCL.

Adición de colchicina para detener migración cromosómica.

Incubación de 72 h a 37°C.

Se adiciona el cultivo al agente mitogénico (fitohemaglutinina) que induce la fivisión celular

Se realiza cultivo celular con mezclas de aminoácidos, proteínas, CH, NaHCO3 que proveen nutrientes y factores de crecimiento.

A partir de muestra de sangre, se adiciona en un tubo con heparina.

A partir de muestras biológicas (sangre, mucosa oral, fibroblastos, biopsias).

Definición

Es la organización del complemento cromosómico de una especie acorde al tamaño y posición del centrómero.