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door leyda yañez 4 jaren geleden

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La determinación de hemoglobina, hematocrito y cuenta de eritrocitos es esencial en los análisis hematológicos. Los índices eritrocitarios incluyen varios parámetros importantes, como la concentración corpuscular media de hemoglobina (

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DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA, HEMATOCRITO, VSG, CUENTA DE ERITROCITOS E ÍNDICES ERITROCITARIOS

ÍNDICES ERITROCITARIOS

ANCHURA DE LA DISTRIBUCION DE LA HEMOGLOBINA (ADH)

2.2 y 3.2 g/DL

Es la desviación estándar de las concentraciones de hemoglobina de los hematíes
INDICE DE DISTRIBUCION DE LOS HEMATIES (IDH)

igual o inferior al 15%

También se denomina anchura de la distribución eritrocitaria o ADE. Es el coeficiente de variación de los glóbulos rojos.
CONCENTRACION CORPUSCULAR MEDIA DE HEMOGLOBINA (CCMH)

entre 32 - 34 %.

Expresa la concentración porcentual de hemoglobina en cada hematíe.
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (HCM)

entre: 30 -34 pg

Permite determinar la cantidad de hemoglobina contenida en cada hematíe.
VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO(VCM)

entre 85 - 95 f

Permite calcular el volumen promedio de los hematíes.

HEMATOCRITO

MUJERES 39 a 50 %
HOMBRES 46 a 56 %
MÉTODO DEL MICROHEMATOCRITO

c) Centrifúguese en la centrífuga para microhematocrito durante 5 min.

b) Cierre el extremo del tubo capilar distante de la sangre acercándolo a la flama del mechero y rotándolo, también se puede sellar con plastilina (cerciórese de que el cierre de dicho extremo haya sido completo).

a) Llenar con sangre capilar o venosa un tubo capilar aproximadamente tres cuartas partes del total de su longitud.

MÉTODO DEL MACROHEMATROCRITO

b) Con una pipeta Pasteur llénese de sangre el tubo Wintrobe hasta la marca de “0” cero.

a) Calcule el hematocrito, centrifugando el tubo a 3500 r.p.m. durante 30 minutos. En caso de no contar con esta preparación efectuar el procedimiento .

DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA

EL MÉTODO DE CIANOMETAHEMOGLOBINA

B. MUJERES 12.5 a 16.5 g/dl 7.5 a 10.33 mmol/l

A. HOMBRES 15 a 20 g/dl 9.3 a 12.4 mmol/l

CURVA DE CALIBRACIÓN

f) Extrapola las absorbancias de las muestras problema.

e) Trazar una línea perpendicular que parta del vértice (O) y toque el mayor número de puntos.

d) Graficar en papel milimétrico, en las ordenadas (Y) las absorbancias y en las abscisas (X) las concentraciones.

c) Medir la absorbancia de cada dilución en el espectrofotómetro a 540 nm, contra el blanco (B).

b) Pipetear con precisión, de la solución valorada de Cianometahemoglobina (St) de concentración de 20 g/dl y del Reactivo de Drabkin, en cada uno de los tubos correspondientes y mezclar bien.

a) Marca 5 tubos de ensaye de 13x100 mm: Blanco (B), 5, 10, 15, 20 g/dl

5) Calcular la concentración de la Hemoglobina, a partir de la Ley de Beer o bien extrapolar en la curva de calibración

4) Ajustar el espectrofotómetro a cero de absorbancia con el blanco de reactivo (B) a 540 nm. y se lee la absorbancia del tubo problema.

3) Se mezcla vigorosamente con cuidado. Dejar reposar la mezcla por 5 minutos. Pasar a las celdas.

2) Con la pipeta de Shali, se toma 0.02 ml (20l) de sangre limpiando perfectamente la pipeta por fuera con un segmento de papel desechable humedecido con solución salina, se pasan al tubo, lavando la pipeta 2 o 3 veces, por aspiración y expulsión del reactivo dentro de la misma.

1) Se marcan 2 tubos de ensayo, uno como blanco (B) y otro como problema (P) y se colocan 5 ml. del Reactivo de Drabkin en cada uno.

FUNDAMENTO.

Para convertir la Hb-O2 en Hb-CN se utiliza el Reactivo de Drabkin, el cual contiene ferricianuro de potasio K3Fe (CN)6 que convierte el Fe++ en Fe+++ convirtiéndose en metahemoglobina. Luego el KCN del mismo reactivo se combina para formar la Cianometahemoglobina, cuyo pico máximo de absorción es de 540nm con un rango de 530 a 550 nm.

CUENTA DE ERITROCITOS

MUJERES: 4.1 a 5.7 Millones / mm3 o ul
HOMBRES: 5.5 a 6.3 Millones / mm3 o ul
MÉTODO EN CÁMARA NEWBAWER

f) Una vez concluido el conteo, lavar la cámara con el agua de la llave, agua destilada y finalmente con alcohol. Secar con un paño limpio, suavemente y utilizar jabón si es necesario

e) Dejarla reposar por dos minutos, colocarla bajo el objetivo seco fuerte (40x) y contar los eritrocitos presentes en los cinco cuadros marcados con la letra E, utilizando el método señalado.

d) Eliminar de 4-5 gotas de la pipeta y con la siguiente llenar por capilaridad la cámara de Neubauer previamente preparada.

c) Se debe de evitar la formación de burbujas. Agitar la pipeta suavemente para mezclar o bien mezcle por medio de agitador electrónico si es que cuenta con él.

b) Aspirar luego el líquido diluyente de eritrocitos hasta la marca 101.

a) Con la ayuda de la boquilla o el micro pipeteador, se aspira sangre homogeneizada con la pipeta de Thoma para eritrocitos hasta la marca de 0.5

El líquido diluyente de Gower para eritrocitos es isotónico y actúa como fijador para preservar la forma celular.

VSG

VALORES DE REFERENCIA
MUJERES 0 a 15 mm/hr.
HOMBRES 0 a 7 mm/hr.
MÉTODO DE WINTROBE
PROCEDIMIENTO

4. Leer la altura de la columna de plasma que aparece en la parte superior, en la escala que va

3. Colocar el tubo verticalmente en la gradilla (fijarse que este nivelada) durante una hora.

2. Llenar la pipeta Pasteur de sangre, después introducir la punta hasta el fondo del tubo de Wintrobe e ir vistiendo lentamente evitando la formación de burbujas, hasta llegar a la marca de “0”.

1. Mezclar bien el tubo que contiene la sangre.

FUNDAMENTO

Consiste en dejar que la sangre sedimente por la acción de la gravedad formando un paquete más o menos compacto separado del plasma