作者：fernando tagle torreblanca 4 年以前
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Es usado principalmente para:
Determinación de movilidad
Crecimiento solo en el sitio de punción
Si la movilidad es positiva habrá turbidez difusa en el medio
Pruebas bioquímicas
Técnicas para favorecer crecimiento
Puede ser por:
Estriado simple
Picadura
Esta consiste en el uso de un agar inclinado
Técnicas para favorecer crecimiento
Instrumentos de siembra
Asa bacteriológica, hisopo
Patrones de estriado que favorecen crecimiento masivo
Estría cruzada
Estría en cuadrante radial
Estría en cuadrantes
Estría recta
Técnicas de aislamiento:
Aprovechamiento de características particulares de algún μoo
Formación de esporas, anaerobio, sustratos poco comunes
Mediante la utilización de medios de cultivo selectivos
Contienen alguna sustancia que inhibe a algunos μoos pero no afecta el crecimiento del μoo que se desea estudiar
Por agotamiento de un pequeño inóculo en un medio de cultivo sólido
Diferentes técnicas de siembra
Por separación física
diluciones
Medio líquido
Se puede resumir de la siguiente forma:
Objetivo de la siembra
Considerar la presentación del medio líquido
Instrumento detransferencia
Depende del tipo de muestra y del objetivo de la siembra
Tipo de muestra de procedencia
Tipo de medio Preparaciones previas
Consta de una serie de pasos para llevarse a cabo
Asa bacteriológica, micológicay aguja
Pipeta Pasteur, serológica y la automática
Utilización de medios de cultivo estériles
Utilización de instrumentos para transferencia estériles
Trabajo dentro de la "Zona aséptica" (cerca de la flama)
Limpieza de la zona de trabajo / manos
Pigmentación
El pigmento no se aprecia en las células individuales a que se debe a gránulos intracelulares muy pequeños para verse con luz transmitida.
Esta característica es muy común en las bacterias saprófitas en las que las colonias aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc.
Superficie
Puede ser uniformemente brillante y suave o puede ser estriada con muescas concéntricas o quebradas.
Consistencia y textura
Hasta una colonia viscosa que se pega al asa y forma filamentos o hilos mucosos cuando se trata de separarla del agar.
La consistencia de las colonias puede variar desde una colonia seca que puede moverse sobre el agar con el as.
Forma
Está determinada por su borde y su espesor.
Tamaño
Esta característica es bastante constante dentro de las especies y puede ir desde colonias muy diminutas hasta un diámetro de varios milímetros.
Subtopic
Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una misma especie
Cultivo mixto
Varios tipos de microorganismos
Cultivo puro
Para obtener un cultivo puro a partir de una muestra de un ambiente natural es necesario aplicar "técnicas de aislamiento"
Sólo existe un tipo de microorganismo
Adquisición, autentificación, reproducción, preservación,distribución y desarrollo
Microorganismos y líneas celulares de referencia
Poseen una dotación genética simila r y conservan ciertas características por generaciones
Conjunto de microorganismos que derivan de progenitores bien definidos
Identificación de sus características genotípicas y fenotípicas
“Biblioteca de microorganismos”
Liofilización
Congelación
Guardar en refrigeración
Resiembras periódicas
Una vez "aislado" → siembra en 2 tubos
Reserva
Trabajo
Microscópicas
Morfología, agrupación, Gram, etc.
Macroscópicas
Morfología colonial
Esto garantiza el "aislamiento"
Se utilizan jarras de anaerobiosis
Se utiliza medios reductores como cistina, tioglicolato o Na2S.
Introduciendo aire estéril en el medio
Aumentando la ventilación por agitación constante del medio líquido inoculado
Pero si se quiere obtener organismos aerobios en grandes cantidades se debe incrementar la exposición del medio a la atmósfera
Por su aplicación
De mantenimiento / transporte
Preservar la viabilidad de las células al ser transportadas al sitio del estudio.
De valoración / de prueba
Vitaminas y aminoácidos
Efecto de antibióticos / desinfectantes
Para cuantificación de bacterias
Cantidad de moos, calidad microbiológica de agua, leche, etc.
Enriquecidos
Ejemplo: Agar sangre
Permiten el desarrollo de moos exigentes Son químicamente complejos o ricos en nutrientes
Diferenciales
Ejemplos: MSA, EMB, MacConkey, Agar sangre
Sustancias nutritivas o indicadores que permiten poner de manifiesto alguna actividad metabólica de un moo
Selectivos
Ejemplos: MSA, EMB, MacConkey
Favorecen el desarrollo de un moo específico y suprimen el crecimiento de otros
Por su estado físico
Semi-sólidos
0.4% a 0.8% de agar
Determinaciones de movilidad
Sólidos
1.5% a 2% de agar
Medio líquido + agente solidificante
Separar moos → desarrollo de colonias aisladas
Líquidos
Enriquecer cultivos
Rehidratar
Hacer diluciones
Por su composición
Complejos
Cultivos de tejidos (riñón, pulmón, embriones de pollo)
Extractos de tejidos animales o vegetales
Ingredientes de naturaleza compleja
Sintéticos / químicamente definidos
Elaboración minuciosa
Alto grado de pureza
Para evitar cambios bruscos de pH
Uso de amortiguadores (Buffer)
Debe haber un valor adecuado de pH que permita iniciar el crecimiento y que no limite la etapa posterior de desarrollo
Los nutrientes en exceso pueden inhibir el crecimiento o resultar tóxicos
Sus exigencias nutricionales y ademas que tanto necesitan
Bases nitrogenadas
Aminoácidos,
Vitaminas,
Son denominados como: Auxótrofo
Bebe suministrarse en un medio de cultivo
Son denominados como: Protótrofo
Mn,Zn,Co, Mo,Ni,Cu
C, O,H, N,S,P,K,Ca, Mg,Fe
Crecimiento microbianox
