af Karen Campoverde 3 år siden
419
Mere som dette
Càrrega dels immunocomplexos
Afinitat i avidesa
Concetracció de sals en el medi
més difícil precipitació
pH
6-7,5
Ac
Concentracions (Punt d'equivalència)
1 molècula d’Ag per 3 o 4 d’Ac
Ac i Ag multivalents
Es necessita presencia d'un marcador
Fixació del complement
Sistema del complement
Interpretar resultats
Sedimentació dels eritròcits.
Lisis eritròcits.
Afegir un sistema indicador (eritròcits amb hemolisines).
Incubar el sèrum problema amb l’antigen i el complement.
Mesurar el nivells d'anticossos en sèrum.
Comporta la lisis de les membranes cel·lular del eritròcits.
Proteïnes plasmàtiques.
Precipitació
Medi semisòlid
RID
Procediment
Realitzar una corba de treball i calcular concentración.
Visualitzar els anells i mesurar els diàmetres.
Col·locar en càmara humita i permetre la difusió.
Posar estàndards i mostres
Preparar agar amb un dels components.
Apareix un anell de precipitació degut a la difusió.
Forma un gradient de concentració.
Apareix en la zona de equivalència
L'àrea té relació amb la concentració component que difon pel gel.
Sembrant un Ag o Ac en un pouet de gel d'agarosa amb el component complementari al sembrat.
Quantificació d'Ag
Tècnica de difusió radial doble de Ouchternoly
Determinar l’existència o no de determinants comuns entre Ags
Estudi d'indentitat Ag
Sembrant en pouets l'Ag i l'Ac en un gel d'agarosa.
L'Ag-Ac es difonen de manera radial, creant un arc de precipitació.
Es podrà saber aproximadament la concentració de la substància problema.
Prop del pou amb menys concentració o PM superior.
Disfusió de macromolècules en gel.
La velocitat
Temperatura
Pes molecula de Ag i Ac.
Concentració de Ag i Ac.
Concentracció del gel.
En zona de equivalència es formen immunocomplexes que precipiten.
Bandes
Halos
Arcs
Linies
Medi líquid
Turbidimetria
Permet valoració quantitativa sense separar el producte de la solució amb espectrofotòmetre.
Grans concentracions de partícules disperses.
Mesura de la llum transmesa a través d’una suspensió.
Immunonefelometria
més exacte per la mesura de l’opacitat.
Mesura llum dispersada en direcció diferent a la llum emesa amb el Nefelòmetre.
Petites concentracions de partícules disperses.
altres proteïnes sèriques
Presencia d'Ac
factors del complement
proteïnes de fase aguda
mesura la terbolesa que produeix la precipitació d’immunocomplexes.
Complexe Ag-Ac en forma de xarxa insoluble.
Aglutinació
Valoració
Difícil determinar quantitativament la concentració de la subs investigada.
Concentracció = Títol x UMD
Es fan dilucions seriades de mostres problemes amb una concentració decreixent.
Alt grau sensibilitat i gran quantitat Ag que es pot detectar
Tipus
Indirecte
Hemaglutinació indirecta passiva
Hematies amb la substància que es vol estudiar
Aglutinación -: indica presència de la substància
Aglutinación +: indica absència de la substància.
Quan l'Ac s’uneix a la substància i no als glòbuls vermells no és produeix aglutinació.
Al posar-el en presència d’Ac preparats contra aquella substància, es produirà aglutinació.
Consisteix en el recobriment de aglutinogen sobre les partícules per unir-los a l'Ac
Els aglutinògens estan enganxats a esferes de làtex o a cèl·lules vitals.
Directe
Acs incomplets
Sensibilitza el seu Ag sense aglutinar-lo
Suspensió de bacteris, protozous, espores i hematies
DCT
Busca que Ac que puguin fixar-se als glòbuls vermells i causar l'hemòlisis.
l’aglutinogen es troba sobre la superfície d’una cèl·lula.
Més sensible per detectar petites quantitats d'Ac, que les reaccions de precipitació.
Es la formació d'agregats Ac-Ag
Pot visualitzar-se a simple vista o amb microscopi.
El Ac es denomina aglutinina.
L’Ag es denomina aglutinogen.
