Métodos de diagnostico viral

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Métodos de diagnostico viral

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Diagnóstico molecular

Amplificación de A.N

Amplificación de desplazamiento múltiple

influenza, coronavirus SARS, y bocavirus humano

Muestra

métodos de amplificación isotérmicos inspirados en el sistema transcripcional de virus usando transcriptasa inversa RT, ARN polimerasa T7 y ARNasa H

PCR multiple

Influenza, Parainfluenza, coronavirus, adenovirus

Respiratorias, LCF, entéricas

Permite la amplificación de diferentes secuencias en un mismo tubo

PCR en tiempo real

VIH, hepatitis, citomegalovirus y paramoxyvirus

Permite cuantificar mediante la medición de una señal fluorescente emitida por un fluoro foro donde la intensidad de la señal es proporcional al producto amplificado

RT-PCR

Virus de papiloma humano y VIH

Sangre circulante y otros fluidos

Permite identificar virus de RNA mediante una fase previa donde el ARN es retrotranscripto

Micro arreglos moleculares

El virus de la rubeola, citomegalovirus y el virus del herpes

tejidos, proteínas y material genético)

Sondas de ADN se encuentran fijos, el ADN es amplificado con fluorocromos para después ser hibridado con sondas de patógenos conocidos lo cual es reconocido por un software

Sondas genómicas

Virus de papiloma humano, hepatitis B y citomegalovirus

toma de muestra sanguínea, biopsia, tejidos incluidos en parafina, cultivo de tejidos, células presentes en exudados o líquidos corporales (orina, LCR, secreciones respiratorias o genitales)

Sondas de ADN o ARN especificas a un grupo viral que forman híbridos marcados con enzimas o radiactivamente que son reconocidos por métodos colorimétricos

Directos

Aislamiento viral

virus herpes simplex (HSV), citomegalovirus (HCMV), virus respiratorio sincitial (RSV) e influenza

Depende de ña ruta de excreta del virus

Utilizar el tropismo viral para aislar el virus en animales, huevos embrionados o líneas celulares

Citología exfoliativa

virus HSV, CMV y VZV

lesiones mucosas o cutáneas

Identificación de las lesiones por infección viral mediante el microscopio de luz

Microscopia electrónica

Hepatitis B, papiloma humano y Parvovirus B19

Materia fecal, secreciones nasofaríngeas, lavado pulmonar, LCR, tejido cerebral

se basa en la identificación morfológica del viriones

Indirectos: detección de antígenos virales

Inmunocromatografía

virus respiratorio sincicial, virus influenza A y B y adenovirus

Después de realizar una EIA sándwich, posteriormente, el espécimen y conjugado migran por capilaridad hasta encontrar un anticuerpo de captura, el antígeno se une a él y el anticuerpo control da la reacción positiva

Aglutinación de látex

Rotavirus, adenovirus y HSV

Sangre

Se utilizan partículas de látex recubiertas con el anticuerpo especifico que se mezclan con la muestra, en presencia del antígeno viral se formará un acumulo

Inmunoensayo en fase sólida

Rotavirus, hepatitis B, VRS, citomegalovirus, coronavirus, Coxsackievirus e influenza

fluidos corporales como sangre, orina, LCR

Consiste en inmovilizar un antígeno afín a cierto antígeno para formar un complejo antígeno.-anticuerpo. la formación del conjugado se evidenciará por enzimas en conjugados

Inmunofluorescencia

Ejemplos a identificar

HSV-1 y HSV-2, VZV, CMV, EBV, virus influenza A y B, virus respiratorio sincicial, metapneumovirus, virus parainfluenza, adenovirus, sarampión, parotiditis, rubéola y rabia

Muestras

células descamativas, células tomadas a partir de hisopado o escarificación, células tomadas de improntas y biopsias por congelación

Fundamento

Utiliza un fluorocromo para determinar la formación de un complejo antígeno-anticuerpo