Nome: Enrico Diniz Rodrigues Batista
Aluno de graduação de Eng. Biotecnológica
29/09/2018
Microenxertia
Metodologia para
a realização de
microenxertia
I - Obtenção do
Porta -enxerto
e do microenxerto
II - O epicótilo do porta-enxerto é excisado
III - É realizado um corte em "T" invertido no epicótilo
IV - Transferência do meristema para a
base em "T"
V- Aclimatação da planta
Usa como base o conceito da técnica
de enxertia: na qual temos um "porta enxerto" que serve de base para um "enxerto" se desenvolver.
Microenxerto: obtido através da excisão
do ápice meristemático de gemas laterais
Porta-enxerto: obtido através da
germinação in vitro
Micropropagação
Problemas
Aclimatação
A planta pode morrer na
transferência para o solo
Variação somaclonal
Mutações podem ocorrer e alterar
o genoma de maneira a prejudicar
a obtenção de clones
Laboratórios caros
Protocolos regenerativos
não disponíveis à todas
as espécies
Algumas espécies não respondem
à CT, essas são denominadadas de
recalcitrantes.
Necessita de uma
maior capacitação
tecnológica
A mão de obra especializada necessária
pode ser cara ou indisponível
Requer instalações
e equipamentos
especializados;
Por se tratar de uma
técnica cara, há
impedimentos financeiros
Fatores que influem
na micropropagação
Reguladores de crescimento
Podem se apresentar em fase líquida, sólida ou bi-fásica
Escolha do regulador dependerá da espécie e da morfogênese desejada
Citocinina: estimula a divisão celular e a formação da parte aérea
Auxina: estimula formação de calos, gemas e raízes
Mais utilizados: auxinas, citocininas e giberilinas
Podem inibir ou estimular o crescimento
Meios de cultura
Fonte de CO2 e O2 para a planta
Contém reguladores de crescimento
Serve também como suporte físico
o meio deve conter todas
as fontes de micro e macronutrientes
Oxidação
Oxidação fenólica
Adição de carvão ativado e antioxidantes pode reduzir a taxa de oxidação
Muda conforme o explante selecionado
A ocorrência depende do gênero e da espécie trabalhada
Contaminação
Principal problema quanto ao cultivo. Pode decorrer pela presença de fungos ou bactérias no meio devido a desinfecção incorreta ou ineficiente
Desinfecção
Desinfecção dos explantes
Desinfecção dos instrumentos
Tratemento pode começar na planta matriz
As vias de desinfeção envolvem normalmente: autoclavagem dos instrumentos; tratamento da planta matriz com antibióticos/antifúngicos; desinfecção dos instrumentos e explantes envolvendo álcool, hipoclorito de sódio e água destilada.
Seleção de explantes
- Explantes mais utilizados: caulinares, gemas axilares e meristemas
- Devem preferencialmente ser retirados de plantas que não estejam passando por estresse
- O tipo de explante utilizado determina, muitas vezes, o grau de sucesso na micropropagação.
- Tamanhos podem variar de 0,2 a 20mm ou mais.
- Tecidos maduros também podem ser usados, porém são menos preteridos que tecidos jovens
- Geralmente utilizados explantes de tecidos jovens
- Qualquer tecido é capaz de expressar a totipotência
Aplicações
Clonagem in vitro
Produção massiva de plantas
Cultivo de mudas independente
das condições ambientais
Acelera programas
de melhoramento
Criação de mudas livre de patógenos
Manuntenção de coleções de plantas
com genótipos diferentes
Possibilita transformações
genética
Regeneração por
cultura de tecidos
Conceitos
Baseia-se no princípio de totipotência
das células vegetais, isto é, no seu potencial de produzir órgãos ou embriões que originarão uma planta inteira, desde que em condições de cultivo adequadas
Permite a regeneração de uma planta inteira a partir de um segmento de uma planta matriz
A micropropagação é um método de propagação vegetativa amplamente
estudado em diversas espécies vegetais.
