Micropropagação

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Nome: Enrico Diniz Rodrigues Batista Aluno de graduação de Eng. Biotecnológica 29/09/2018

Microenxertia

Metodologia para a realização de microenxertia

I - Obtenção do Porta -enxerto e do microenxerto

II - O epicótilo do porta-enxerto é excisado

III - É realizado um corte em "T" invertido no epicótilo

IV - Transferência do meristema para a base em "T"

V- Aclimatação da planta

Usa como base o conceito da técnica de enxertia: na qual temos um "porta enxerto" que serve de base para um "enxerto" se desenvolver.

Microenxerto: obtido através da excisão do ápice meristemático de gemas laterais

Porta-enxerto: obtido através da germinação in vitro

Problemas

Aclimatação

A planta pode morrer na transferência para o solo

Variação somaclonal

Mutações podem ocorrer e alterar o genoma de maneira a prejudicar a obtenção de clones

Laboratórios caros

Protocolos regenerativos não disponíveis à todas as espécies

Algumas espécies não respondem à CT, essas são denominadadas de recalcitrantes.

Necessita de uma maior capacitação tecnológica

A mão de obra especializada necessária pode ser cara ou indisponível

Requer instalações e equipamentos especializados;

Por se tratar de uma técnica cara, há impedimentos financeiros

Fatores que influem na micropropagação

Reguladores de crescimento

Podem se apresentar em fase líquida, sólida ou bi-fásica

Escolha do regulador dependerá da espécie e da morfogênese desejada

Citocinina: estimula a divisão celular e a formação da parte aérea

Auxina: estimula formação de calos, gemas e raízes

Mais utilizados: auxinas, citocininas e giberilinas

Podem inibir ou estimular o crescimento

Meios de cultura

Fonte de CO2 e O2 para a planta

Contém reguladores de crescimento

Serve também como suporte físico

o meio deve conter todas as fontes de micro e macronutrientes

Oxidação

Oxidação fenólica

Adição de carvão ativado e antioxidantes pode reduzir a taxa de oxidação

Muda conforme o explante selecionado

A ocorrência depende do gênero e da espécie trabalhada

Contaminação

Principal problema quanto ao cultivo. Pode decorrer pela presença de fungos ou bactérias no meio devido a desinfecção incorreta ou ineficiente

Desinfecção

Desinfecção dos explantes

Desinfecção dos instrumentos

Tratemento pode começar na planta matriz

As vias de desinfeção envolvem normalmente: autoclavagem dos instrumentos; tratamento da planta matriz com antibióticos/antifúngicos; desinfecção dos instrumentos e explantes envolvendo álcool, hipoclorito de sódio e água destilada.

Seleção de explantes

- Explantes mais utilizados: caulinares, gemas axilares e meristemas

- Devem preferencialmente ser retirados de plantas que não estejam passando por estresse

- O tipo de explante utilizado determina, muitas vezes, o grau de sucesso na micropropagação.

- Tamanhos podem variar de 0,2 a 20mm ou mais.

- Tecidos maduros também podem ser usados, porém são menos preteridos que tecidos jovens

- Geralmente utilizados explantes de tecidos jovens

- Qualquer tecido é capaz de expressar a totipotência

Aplicações

Clonagem in vitro

Produção massiva de plantas

Cultivo de mudas independente das condições ambientais

Acelera programas de melhoramento

Criação de mudas livre de patógenos

Manuntenção de coleções de plantas com genótipos diferentes

Possibilita transformações genética

Regeneração por cultura de tecidos

Conceitos

Baseia-se no princípio de totipotência das células vegetais, isto é, no seu potencial de produzir órgãos ou embriões que originarão uma planta inteira, desde que em condições de cultivo adequadas

Permite a regeneração de uma planta inteira a partir de um segmento de uma planta matriz

A micropropagação é um método de propagação vegetativa amplamente estudado em diversas espécies vegetais.