jonka Satu Westerholm 5 vuotta sitten
247
siirto soluun
DNA-pätkä(usein plasmidi) katkaistaan samoilla restriktioentsyymeillä kuin alkuperäinen geeni katkaistaan Geeni liitetään DNA-pätkään ligaasientsyymin avulla.
DNA-pätkän yhteyteen liitetään sopiva säätelyalue sekä geeni, joka myöhemmin ilmentää, onko geenin siirto onnistunut (antibioottiresistenssigeeni, resistenssigeeni torjunta-aineelle, merkkigeeni, kuten hohtamista aiheuttava geeni, yms.)
säätelyalue voidaan valita niin, että geeni toimii vain tietyssä halutussa solutyypissä
siirretäänkö geeni kehittyneeseen yksilöön(tai alkeellinen yksilö) vai uuteen yksilöön?
munasolu ja siittiö ovat yhtyneet, mutta tumat ovat erillään(ei ole kyse tsygootista)
myöhemmin geeni kaikissa soluissa
periytyy
siirretään useita kappaleita geenistä mikroinjektion avulla toiseen näistä tumista
geeni voi siirtyä nolla, yksi tai monta kertaa solun tai solujen genomiin
useamman kokeilun jälkeen saadaan lopulta haluttu siirtogeeninen eliö
sopiva yksilö huomataan geenin yhteyteen liitetystä geenistä(kuten merkkigeeni) TAI koettimella/DNA-sirun avulla
siirtogeeninen yksilö on valmistettu
geeni siirretään haluttuun soluun vektorin avulla
geeni vain osassa soluja
ei periydy ellei liity ituradan soluihin
sähköimpulssi
geenipyssy
agrobakteeri
liposomi
plasmidi
geeniterapia toimii samalla tekniikalla
geeni voi olla plasmidissa tai hiivalla tumassa tai jopa keinotekoisena krosomina
käänteiskopioijaentsyymin avulla valmistetun vastin-DNA:n avulla myös ei-bakteerisoluja voidaan monistaa bakteeriviljelmissä