CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
¿Qué analitos y en qué muestras se aplica el método elegido?
Muestras de aplicación
Analito 5
Principio activo en una dosis de pregabalina
Analito 4
Componentes agregados a los jarabes
Analito 3
Clorhidrato de cetirizina en cápsulas
Analito 2
Cantidad de conservante
(benzoatos de sodio y potasio)
Analito 1
Aminas aromáticas heterocíclicas
Elaboración de alimentos
Analitos
Diversidad de grupos polifuncionales
de alto peso molecular
Especies organometálicas
Hidrocarburos
Fármacos
Carbohidratos
Esteroides
Antibióticos
Plaguicidas
Terpenoides
Ácidos nucleicos
Proteínas
Aminoácidos
Componentes poliméricos
Productos naturales lábiles
Especies iónicas
Conclusiones y recomendaciones
Recomendaciones
Es recomendable que se utilicen materiales de calibración y de control comerciales
los detectores electroquímicos es recomendable emplearlos cuando se estudian analitos con propiedades oxidantes o reductoras
Es recomendable utilizar los detectores de índice de refracción.
Conclusiones
La cromatografía liquida de alta resolución
es uno de los métodos mas preciosos ya que
su rango de error es mínimo permitiendo así
que no sea destructiva y rápida. Por lo que es
utilizados en analitos farmacéuticos y
alimenticios.
1. Fundamento del método
Tipos de HPLC
Intercambio iónico
Afinidad
Exclusión molecular
Absorción
Métodos en los que se puede operar
Fase normal
Separa los analitos con base en su polaridad.
Par ion
Es empleado especialmente en bases y cationes
Fase reversa
Analiza muestras que contienen sustancias neutrales o no ionizadas
Solubles, en mezclas de compuestos orgánicos y agua
FASE MÓVIL
Una mezcla de sustancias polares y no polares
Varían en concentración dependiendo de la muestra que se quiere analizar
Equipo
7. Cromatograma
6. Sistema de recolección de datos
5. Detectores
4. Columna
3. Sistema de inyección de la muestra
2.Sistema de bombeo
1.Sistema de tratamiento de solventes
Ventajas
No está restringida por la volatilidad o estabilidad térmica de la muestra
La operación es flexible, personalizable y automatizada
Alto poder de separación con detección sensible
Tiempo de separación menor a 30 min por muestra analizada
No es destructiva
Los compuestos separados en la columna pueden ser recolectados
Fácil manipulación de los gradientes generados en la fase móvil
Alta precisión en sus resultados (±0.5 % o menor)
Amplio rango de aplicabilidad
Debido a la alta disponibilidad de equipos columnas
Principios de la HPLC
La fase móvil es líquida
lleva la muestra a través de la fase estacionaria
Capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, de alto peso molecular.
Los componentes con mayor afinidad se desplazarán con menor velocidad, que aquellos que presentan menor afinidad.
Se caracteriza por una fase móvil y una estacionaria y la muestra de interés.
Se emplea para la separación y análisis de los componentes químicos de una mezcla.
