Transformación de plantas mediante edicion genética.
Otras tecnicas de cultivo invitro
cultivo de callos, células proliferantes no especializadas, que crecen en medios semisólidos en presencia de carbohidratos, sales minerales, vitaminas y aminoácidos.
cultivo de células en suspensión, a partir de callos fragmentados y transferidos a medios de cultivo líquidos, que contienen reguladores de crecimiento vegetal.
cultivo de raíces transformadas, crecen en ausencia de reguladores vegetales, y generalmente se obtienen por transformación genética, a través de genes contenidos en plásmidos de bacterias contenidas en Agrobacterium mizo genes, creciendo de esta manera en un repertorio mas amplio.
Micropropagación.
De los meristemos de una planta madre se corta la yema apical, con el fin de obtener una desendencia uniforne, plntas identicas denominadas clones.
Con este método replicamos plantas a partir de un explante, a partir de hojas, tallos, raíces, semillas o cualquier otro órgano, para cultivarlo en laboratorio.
Esta se da en cuatro etapas principales: 1) establecimiento del cultivo, 2) desarrollo y multiplicación de vástagos o em- briones, 3) enraizamiento y 4) aclimatación de las plántulas.
crispr cas9
Se crea una secuencia genética, llamada (ARN guía) que coincida con la pieza de ARN que se desea modificar.
A esta secuencia se le añade una célula junto con una proteína, llamada cas9 y actúan como un par de tijeras que cortan el ADN.
ARN guía se acopla a la secuencia de ADN objetivo, y cas9 la corta, una vez el trabajo esta hecho el ARN guía y el cas9 se retiran.
Por ultimo, otra pieza de ADN reemplaza el ADN antiguo, y las enzimas reparan los cortes, y a quedado editado el ADN
biobalistica
transferencia directa de genes en la células vegetales.
se utiliza un proyectil cargado con micro bolas impregnadas de ADN, las cuales son disparadas a través de la válvula hacia la célula.
El objetivo es crear organismos transgénicos.
Agrobacterium tumefaciens
se tiene en cuenta un gen de interés y un gen selector, y se introduce en eschirichia coli.
multiplicación de E coli y del plásmido binario.
luego se introducen en A. tumefaciens
El genoma bacteriano se toma y se le agrega los explantes de tejido vegetal.
por ultimo se tiene la regeneración de plantas por medio selectivo, en cultivo invitro.
