Influencia del pH en la actividad enzimática
Procedimiento:
l. Recoja 6 ml de saliva en un beaker de 50 mi.
2. Coloque una gradilla con 3 tubos de ensayo numerados del 1 - 3
3. Adicione en cada uno las cantidades que se indican a continuación:
Tubo Nº 1: 2.ml de saliva+ 2 ml de Buffer fosfato 0. IM a pH 3
Tubo Nº 2: 2 ml de saliva+ 2 mI de Buffer fosfato O. IM a pH T
Tubo Nº 3: 2 ml de saliva+ 2 ml de Buffer fosfato 0. lM a pH 11
1. Agite vigorosamente, adicione 2 ml de almidón•al 1% en cada tubo. Agite nuevamente. Y agregue una gota de lugol.
5. Anote el tiempo de desaparición del color en cada pH. Justifique la desaparición del color.
LABORATORIO Nº4
ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS
METODOLOGÍA
Hidrólisis del almidón
Procedimiento:
1. Coloque una gradilla con 6 tubos de ensayo numerados del 1 - 6 y adicione en cada uno las cantidades que se indican a continuación:
Tubo Nº • 1: 2 ml de solución de almidón .
Tubo Nº 2: 2 ml de solución de almidón
Tubo Nº 3: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva sin diluir
Tubo Nº '4: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva sin diluir
Tubo Nº 5: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva diluida hervida
Tubo Nº 6: 2 ml de solución de almidón+ 1 ml de saliva diluida hervida
1. 2. Coloque Jos tubos en baño María a 37ºC, durante 1 O minutos.
2. En los Tubos .1,3 y 5 adicione.. 1gota de lugol (prueba para almidones)
3. 4. En Jos tubos 2, 4 y 6 adicione .1 ml de reactivo de Benedict (prueba para azucares reductores).
Reconocimiento de catalasa en tejidos animales
1. Se coloca en un tubo de ensayo unos trozos de hígado.
2. Se le añade 2 ml de agua oxigenada.
Reconocimiento de catalasa en tejidos vegetales
1. Se coloca en un tubo de ensayo unos trozos de tomate
2. Se le añade 2 ml de agua oxigenada.
Desnaturalización de la catalasa
1. se coloca en un tubo de ensayo unos trozos pequeños de hígado.
2. se le añade agua y se pone a hervir durante unos minutos.
3. después de ese tiempo se retira el agua sobrenadamente.
4. se le añade agua oxigenada, hasta cubrir los trozos de hígado.
MATERIALES
Reactivos
6 ml de agua oxigenada.
2 ml de lugol al 1%
2 ml buffers fosfato 0.1m a ph. de 3,7,11
2 ml de reactive de benedict
Soluciones
20 ml de solución de almidón al 1%
2.gradillas
15.tubos de ensayo
1.pinza de madera
1.breaker de 50 ml
3 pipetas de 10 ml
1 mechero
1 churrusco para tubos
OBJETIVOS
determinar la presencia de enzimas catalasa en tejidos animales y vegetales.
observar el efecto de diferentes factores sobre la actividad enzimática.
comprobar la accion hidrolitica de la amilasa.
