Detecta e Quantifica Vírus e Bactéria.
Determina estágios de câncer.
Genotipagem.
curva padrão
produto gênico
conhecido e diluído seriamente
PCR EM TEMPO REAL OU PCR QUANTITATIVA- qPCR
O resultado é visualizado em Tempo Real durante a amplificação da sequência de interesse.
O equipamento excita um determinado comprimento de onda
(sonda) por meio de LED ou laser
Se liga a dupla fita de DNA
Threshold cycle (ct)
Threshold
Quantifica a quantidade de DNA que possui na amostra.
Analisa a expressão gênica
RT- PCR
Analisa o RNA das amostras
Transcrição gênica e Caracterização dos transcritos.
Resultados: eletroforese de gel de agarose
Transcrição Reversa
O processo pode ser feito em duas etapas:
RT
PCR
RT+ PCR
É preciso produzir DNA a partir do RNA
PCR convencional
Ocorre em três etapas:
1. Desnaturação: alta temperatura de 95º C ocorra a separação da fita de DNA.
2. Anelamento: os primers se ligam as fitas moldes do DNA.
3. Extensão: A Taq DNApolimerase sintetiza novas fitas de DNA, baseando nas fitas iniciais do DNA sentido 5'-3'.
amplificação “in vitro” de uma região específica de DNA.
é utilizado para fazer muitas cópias de uma determinada parte do DNA.
utiliza apenas a DNA polimerase de
organismos termófilos.
Diagnósticos.
Detecção de polimorfismos
