PCR convencional

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DNA E RNA

luonut LUCAS DE SOUSA SILVA

Material Genético

luonut Amanda Gomes

B27 - Planejamento

luonut Guilherme Sommer Goulart

Microbiologia

luonut Eulen Gustavo

Detecta e Quantifica Vírus e Bactéria.

Determina estágios de câncer.

Genotipagem.

curva padrão

produto gênico conhecido e diluído seriamente

PCR EM TEMPO REAL OU PCR QUANTITATIVA- qPCR

O resultado é visualizado em Tempo Real durante a amplificação da sequência de interesse.

O equipamento excita um determinado comprimento de onda (sonda) por meio de LED ou laser

Se liga a dupla fita de DNA

Threshold cycle (ct)

Threshold

Quantifica a quantidade de DNA que possui na amostra.

Analisa a expressão gênica

RT- PCR

Analisa o RNA das amostras

Transcrição gênica e Caracterização dos transcritos.

Resultados: eletroforese de gel de agarose

Transcrição Reversa

O processo pode ser feito em duas etapas:

RT

PCR

RT+ PCR

É preciso produzir DNA a partir do RNA

PCR convencional

Ocorre em três etapas:

1. Desnaturação: alta temperatura de 95º C ocorra a separação da fita de DNA.

2. Anelamento: os primers se ligam as fitas moldes do DNA.

3. Extensão: A Taq DNApolimerase sintetiza novas fitas de DNA, baseando nas fitas iniciais do DNA sentido 5'-3'.

amplificação “in vitro” de uma região específica de DNA.

é utilizado para fazer muitas cópias de uma determinada parte do DNA.

utiliza apenas a DNA polimerase de organismos termófilos.

Diagnósticos.

Detecção de polimorfismos